PLCγ1基因对绵羊早期胚胎体外发育的影响

旨在探究磷脂酶Cγ1（phospholipase Cgamma 1，PLCγ1）基因对绵羊早期胚胎体外发育的影响，为揭示PLCγ1基因在早期胚胎发育过程中的作用机制奠定基础。本研究选取包裹3层以上颗粒细胞的绵羊卵母细胞为试验材料，体外培养成熟后将其分为两组，利用显微注射技术将PLCγ1基因导入MⅡ期（减数第二次分裂中期）卵母细胞（n=127）中为试验组，以显微注射空载体pcDNA3.1-EGFP作为对照组（n=120），经48 h后统计其卵裂率；并利用Ca²⁺探针Rhod 2-AM监测MⅡ卵母细胞和显微注射后16、48、72、96、120 h时各时期卵母细胞以及早期胚胎内Ca²⁺波动。结果显示，PLCγ1基因显微注射后卵母细胞被激活，卵裂率为（（19.67±0.2）%，P<0.01），桑椹胚发育率为（（9.00±0.17）%，P<0.05）；PLCγ1基因注射后，卵母细胞和早期胚胎不同发育时期有Ca²⁺浓度变化，可观察发现Ca²⁺主要分布在胞质中且注射48 h时可达到峰值（P<0.01）。结果表明，PLCγ1基因可以引起绵羊卵母细胞发育过程中发生Ca²⁺振荡，启动其卵裂，并促使早期胚胎的继续发育。