| SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达 |
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| 引用本文： | 杨松涛,夏咸柱,乔军,高玉伟,常爽,黄耕,郑明光.SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达[J].吉林农业大学学报,2005,27(3):331-334. |
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| 作者姓名： | 杨松涛 夏咸柱 乔军 高玉伟 常爽 黄耕 郑明光 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;吉林大学农学部,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;吉林大学农学部,长春,130062 |
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| 基金项目： | 吉林省教育厅资助项目(20030612) |
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| 摘 要： | 对SARS病毒核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。根据GenBank中已发表的SARS全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对SARS病毒N蛋白基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-N,进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1269bp,编码422个氨基酸。与Tor2、Urbani和TW1株相比,核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性均为100%。将pGEM-N双酶切,回收目的基因片段并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-N;将其转化表达菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明:重组菌可表达相对分子量约为53kD的蛋白。Western-blotting证实,重组N蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应。经凝胶薄层扫描分析,重组N蛋白表达量约占菌体蛋白的43%。
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| 关 键 词： | SARS病毒 N蛋白基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-5684(2005)03-0331-04 |
| 修稿时间： | 2005年1月25日 |
Cloning, Sequence Analysis and Expression in E. coli of Nucleoprotein Gene of SARS Coronavirus |
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| YANG Song-tao.Cloning, Sequence Analysis and Expression in E. coli of Nucleoprotein Gene of SARS Coronavirus[J].Journal of Jilin Agricultural University,2005,27(3):331-334. |
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| Authors: | YANG Song-tao |
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| Institution: | YANG Song-tao~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SARS virus Nucleoprotein gene cloning expression |
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