| 鸭ChREBP基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响 |
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| 引用本文： | 谭光辉,覃媛钰,王单单,李万贵,罗华伦,吴磊,李杰章,张依裕. 鸭ChREBP基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响[J]. 南方农业学报, 2020, 51(4): 937-944. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.04.026 |
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| 作者姓名： | 谭光辉 覃媛钰 王单单 李万贵 罗华伦 吴磊 李杰章 张依裕 |
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| 作者单位： | 贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵阳,550025六盘水市草地工作站,贵州六盘水,553001 |
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| 摘 要： | [目的]探究鸭原代肝细胞脂质含量与碳水化合物反应元件结合蛋白基因(ChREBP)表达的关联性,为深入研究ChREBP基因对畜禽脂质代谢的遗传调控机制提供参考依据.[方法]采用Ⅳ型胶原酶消化法分离孵化21 d的鸭胚原代肝细胞,以DMEM高糖培养基进行培养.利用RT-PCR扩增鸭ChREBP基因编码区(CDS)序列,构建携带His标签的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His,通过脂质体法分别转染鸭胚原代肝细胞和人前列腺癌细胞(PC3);采用His标签检测试剂盒检测ChREBP基因的表达量,以脂质指标测定试剂盒测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量,并分析鸭胚原代肝细胞和PC3细胞中ChREBP基因表达与脂质指标含量的相关性.[结果]以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞均能发出绿色荧光,表明携带His标签的ChREBP基因能在鸭原代肝细胞和PC3细胞中表达.ChREBP基因表达量与鸭原代肝细胞和PC3细胞中的TG、TC和HDL含量均呈极显著正相关(P<0.01,下同),与LDL含量呈极显著负相关.[结论]以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞后均能发出绿色荧光,说明ChREBP基因表达对鸭原代肝细胞和PC3细胞中的脂质代谢作用机理相似,可促进细胞脂质累积.
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| 关 键 词： | 鸭 ChREBP基因 鸭原代肝细胞 PC3细胞 脂质代谢 |
Construction of duck ChREBP gene expression vector and its effect on lipid characteristics of primary hepatocytes and PC3 cells |
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| TAN Guang-hui,QIN Yuan-yu,WANG Dan-dan,LI Wan-gui,LUO Hua-lun,WU Lei,LI Jie-zhang,ZHANG Yi-yu. Construction of duck ChREBP gene expression vector and its effect on lipid characteristics of primary hepatocytes and PC3 cells[J]. Journal of Southern Agriculture, 2020, 51(4): 937-944. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.04.026 |
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| Authors: | TAN Guang-hui QIN Yuan-yu WANG Dan-dan LI Wan-gui LUO Hua-lun WU Lei LI Jie-zhang ZHANG Yi-yu |
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