| 牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因克隆及序列分析 |
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| 作者姓名： | 赵月兰 郭红斌 张磊 秦建华 张宁 张保宁 |
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| 作者单位： | 河北农业大学中兽医学院 定洲073000(赵月兰，郭红斌，张磊)，河北农业大学动物科技学院 保定071000(秦建华，张宁，张保宁) |
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| 基金项目： | 国家“十一五”科技攻关计划‘华北农区奶牛疾病综合防治技术应用与示范》部分内容,课题编号（2006BAD04A10-4）;河北省百牧局科攻关计划,课题编号2002-4 |
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| 摘 要： | 【目的】对牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因进行克隆及序列分析,为阐明本病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据。【方法】以牛病毒性腹泻病毒河北分离株(HB-DCZ)基因组RNA为模板,扩增BVDVHB-DCZ株基因组NS2-3片段cDNA。将PCR产物克隆后进行PCR及双酶切鉴定。克隆产物进行序列测定及分析。【结果】HB-DCZcDNA体外扩增获得特异性条带,大小约为665bp,表明该分离毒株基因组中无插入序列。PCR产物克隆,提取重组质粒,扩增获得特异性的DNA条带,长度约为665bp,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,获得两条DNA片段,长度分别为2600bp和702bp左右,与理论值相符。序列测定结果表明,克隆得到的NS2-3重要区扩增片段共665核苷酸,NS2-3重要区的蛋白质由208个氨基酸残基组成。HB-DCZ毒株NS2-3重要区核苷酸序列与已公开发表的BVDV其他毒株相比的同源性依次为184株99.1%,ZM195株97.4%,Osloss株92.3%,C_(24)V株77%,NADL株76.4%。HB-DCZ在NS2-3扩增区域中既没有外源序列的插入,也没有基因重组、重排或缺失,但存在某些核苷酸的替换。【结论】HB-DCZ与Osloss株、国内的184株、ZM195株遗传距离较近,与C_(24)V株、NADL株遗传距离较远。HB-DCZ株应为BVDVIb基因亚型。
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 HB-DCZ株 基因组NS2-3片段 克隆 序列分析 |
Cloning and Sequence Analysis of Genetic Variation on NS2-3 of Bovine Viral Diarrhea Virus HB-DCZ Strain |
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| Authors: | Zhao Yuelan Guo Hongbin Zhang Lei Qin Jianhu Zhang Ning Zhang Baoning |
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| Institution: | 1College of Chinese Traditional Veterinary Science, Hebei Agriculture University, Dingzhou 073000; 2College of Animal Science and Technology. Hebei Agriculture University,. Baoding 071000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bovine Viral Diarrhea Virus HB-DZC Virus Strain Cloning Sequencing NS2-3 gene RT-PCR |
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