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鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建
引用本文:徐耀辉,焦新安,李求春,潘志明,黄金林. 鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建[J]. 勤云标准版测试, 2007, 0(7)
作者姓名:徐耀辉  焦新安  李求春  潘志明  黄金林
作者单位:扬州大学生物科学与技术学院,扬州大学生物科学与技术学院,扬州大学生物科学与技术学院,扬州大学生物科学与技术学院,扬州大学生物科学与技术学院 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009,郑州牧专动物医药系,河南郑州450011,扬州大学兽医学院,江苏扬州225009
基金项目:国家“863”计划项目(863-2006AA10A206)和国家自然科学基金(30425031)资助.
摘    要:为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13(实验方)与鸡伤寒沙门氏菌Sg9(驱动方)基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR,得到消减混合物,将其与PCR 2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100~2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。

关 键 词:鸡白痢沙门氏菌  鸡伤寒沙门氏菌  抑制性消减杂交  文库

Construction of a Subtracted DNA Library between Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum
Xu Yaohui,Jiao Xinan,Li Qiuchun,Pan Zhiming,Huang Jinlin. Construction of a Subtracted DNA Library between Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum[J]. , 2007, 0(7)
Authors:Xu Yaohui  Jiao Xinan  Li Qiuchun  Pan Zhiming  Huang Jinlin
Affiliation:1.College of Bioscience and Biotechnology; 2.College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225009; 3.Department of Veterinary Medicine , Zhengzhou College of A nimal Husbandry Engineering, Zhengzhou,Henan 450011
Abstract:
Keywords:Salmonella pullorum  Salmonella gallinarum  Suppression subtractive hybridization  library
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