猪传染性胃肠炎病毒SYBR GreenⅠ模式实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

登录GenBank下载猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的N基因序列，依据保守区设计一对特异性引物，采用SYBR GreenⅠ随机结合渗入法，建立检测猪传染性胃肠炎病毒的实时定量RT—PCR检测方法，成功构建了检测TGEV的标准DNA模板，循环阈值（Ct）与标准DNA模板在1．0×10-1．0×10^7拷贝／μl浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数为0．9985。该方法用于检测TGEV具有很高的特异性，其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍，可以用于猪传染性胃肠炎病毒的快速检测。用建立的检测方法对82份临床样品进行了检测，和普通PCR检测结果100％相符。