火龙果主要病毒RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 管丽婷,乔光.火龙果主要病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国果业信息,2019,48(5). |
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作者姓名: | 管丽婷 乔光 |
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作者单位: | 贵州大学生命科学学院/贵州大学农业生物工程研究院,贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目) |
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摘 要: | 建立快速而稳定的火龙果病毒病分子检测体系,为火龙果病毒病的分子生物学鉴定提供技术支持。本文以感病的火龙果茎为研究材料,根据火龙果主要病毒病Pitaya virus X(PiVX)、Schlubergera virus X(SchVX)、Cactus virus X(CVX)及Zygocactus virus X(ZyVX)的保守序列设计特异性引物,运用RT-PCR技术进行扩增,将目的片段回收、克隆和测序。结果表明四种病毒序列与NCBI数据库里相应病毒核苷酸序列均具有较高的一致性。利用梯度稀释法依次将cDNA稀释为2、22、23、24、25、26、27倍,对各病毒灵敏度进行分析,结果显示,能检测出大部分病毒的火龙果cDNA最低浓度是45.75 ng·μL-1。应用该方法对贵州省罗甸县部分火龙果生产园内植株进行病原检测,结果显示该检测体系能特异、灵敏、稳定地检测出PiVX、SchVX、ZyVX及CVX这四种病毒。
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关 键 词: | 火龙果 病毒 RT-PCR 检测 |
收稿时间: | 2018/11/23 0:00:00 |
修稿时间: | 2018/12/28 0:00:00 |
Development and Application of RT-PCR for Pathogen detection of Pitaya virus disease |
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Abstract: | |
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Keywords: | Pitaya Virus RT-PCR Detection |
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