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猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验
引用本文:张宁,侯韶毅,韦英益,李茂宁,肖爱欢,谢丽华,刘芳,高永锐,卢桂娟,陆有飞,黄伟坚. 猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验[J]. 畜牧与兽医, 2010, 42(1)
作者姓名:张宁  侯韶毅  韦英益  李茂宁  肖爱欢  谢丽华  刘芳  高永锐  卢桂娟  陆有飞  黄伟坚
作者单位:1. 广西大学动物科技学院,广西,南宁,530005
2. 广西梧州市动物疫病预防控制中心,广西,梧州,543002
3. 广西丽原生物股份有限公司,广西,南宁,530001
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目,广西科学研究与技术开发计划项目,广西科技基础条件平台建设示范研究项目 
摘    要:为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。

关 键 词:ORF2截短基因  重组质粒  间接免疫荧光试验  组合免疫  免疫保护效果

Experiment on immune protection of DNA vaccine against porcine circovirus 2 in mice
ZHANG Ning,HOU Shao-yi,WEI Ying-yi,LI Mao-ning,XIAO Ai-huan,XIE Li-hua,LIU Fang,GAO Yong-rui,LU Gui-juan,LU You-fei,HUANG Wei-jian. Experiment on immune protection of DNA vaccine against porcine circovirus 2 in mice[J]. Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2010, 42(1)
Authors:ZHANG Ning  HOU Shao-yi  WEI Ying-yi  LI Mao-ning  XIAO Ai-huan  XIE Li-hua  LIU Fang  GAO Yong-rui  LU Gui-juan  LU You-fei  HUANG Wei-jian
Affiliation:ZHANG Ning1,HOU Shao-yi1,WEI Ying-yi1,LI Mao-ning1,XIAO Ai-huan1,XIE Li-hua2,LIU Fang1,GAO Yong-rui3,LU Gui-juan3,LU You-fei3,HUANG Wei-jian1* (1.College of Animal Science , Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China,2.Wuzhou Center for Animal Disease Control , Prevention,Guangxi 543002,3.Guangxi Liyuan Biology Co.,Ltd.,Nanning 530001,China)
Abstract:To study immune efficacy of DNA vaccines with truncated ORF2 gene of porcine circovirus 2(PCV-2), the ORF2 associated gene fragments, including A (complete ORF2), B (51-100aa), C (101-150aa), D (181-235aa), E (151-200aa), F (51-150aa), G (101-235aa) and H (51-235aa), were amplified from PCV-2 GXWZ-1 strain by PCR and cloned into pcDNA3.0 vector to construct the eukaryotic expression plasmids pcDNA-A, pcDNA-B, pcDNA-C, pcDNA-D, pcDNA-E, pcDNA-F, pcDNA-G and pcDNA-H. The eight purified recombinant plasmids we...
Keywords:PCV-2  ORF2 truncated gene  recombinant plasmids  indirect immunofluorescence assay  combined immunity  immuno-protection effect  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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