| 海岛棉纤维发育相关基因GbPDF2酵母单杂交文库构建及其上游基因解析 |
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| 引用本文： | 郑云娜,代华琴,曹跃芬,李金娟,戎均康,丁明全. 海岛棉纤维发育相关基因GbPDF2酵母单杂交文库构建及其上游基因解析[J]. 棉花学报, 2014, 26(3): 204-212. DOI: 1002-7807（2014）03-0204-09 |
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| 作者姓名： | 郑云娜 代华琴 曹跃芬 李金娟 戎均康 丁明全 |
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| 作者单位： | 1. 浙江农林大学/亚热带森林培育国家重点实验室培育基地，浙江 杭州 311300；2. 浙江农林大学/浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室，浙江 杭州 311300 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31071421；31200909)；浙江省自然科学基金(LQ12C06002)；抗草甘膦转基因棉花研发(浙江省新安化工集团股份有限公司，2013-2014) |
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| 摘 要： | 为研究棉纤维起始发育的分子调控网络,以海岛棉(Gossypium barbadence L.)品种"海渝"开花当天(0 DPA)胚珠为实验材料,利用酵母单杂交技术来筛选棉纤维起始发育相关基因GbPDF2的上游调控转录因子。首先,克隆GbPDF2的启动子(Accession:KJ475468);构建了该启动子的诱饵融合载体(GbPDF2-PRO)-pAbAi,转入酵母细胞中重组为Y1HGold[Bait-pAbAi]菌株。之后,应用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System系统构建酵母单杂交cDNA文库,转化重组酵母菌株,通过同源重组筛选GbPDF2的上游转录调节因子。构建的cDNA文库库容为2.23×106,重组率为95.8%,插入片段大小为300 bp~2000 bp,其中大于1000bp的阳性克隆为109个。cDNA插入片段经测序和Blast同源性分析,筛选出2个生长素响应因子,1个WRKY7转录因子,1个WD-repeatprotein 40等与纤维发育相关的转录调节因子,为研究棉纤维起始发育的信号转导通路奠定了基础。
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| 关 键 词： | 棉花纤维 基因功能 酵母单杂交 SMART技术 cDNA文库 |
| 收稿时间： | 2014-01-17; |
Yeast One-hybrid Library Construction and Upstream Gene Analysis of GbPDF2 in Gossypium barbadence L. |
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| Zheng Yunna,Dai Huaqin,Cao Yuefen,Li Jinjuan,Rong Junkang,Ding Mingquan. Yeast One-hybrid Library Construction and Upstream Gene Analysis of GbPDF2 in Gossypium barbadence L.[J]. Cotton Science, 2014, 26(3): 204-212. DOI: 1002-7807（2014）03-0204-09 |
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| Authors: | Zheng Yunna Dai Huaqin Cao Yuefen Li Jinjuan Rong Junkang Ding Mingquan |
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| Affiliation: | 1. Zhejiang A&F University / State Key Laboratory of Subtropical Forest Culture Cultivation Base, Hangzhou, Zhejiang 311300; 2. Zhejiang A&F University / Key Laboratory of Agricultural Products Quality Improved Technological Research of Zhejiang Province, Hangzhou, Zhejiang 311300, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gene function yeast one-hybrid SMART technology cDNA library |
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