马铃薯和拟南芥 GAPC 酶基因的克隆及分析简

 胞质三磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＣ）是糖酵解中的关键酶，近年的研究表明其对盐、低温、高温、氧化、高渗、低磷等多种逆境胁迫均有响应。本实验采用ＲＴ－ＰＣＲ，分别从马铃薯和拟南芥中克隆ＧＡＰＣ 的编码区序列（ＣＤＳ），并作生物信息学比较，同时构建２个基因的植物表达载体。结果表明，StGAPC 和AtGAPC２ 的ＣＤＳ 长度均为１０１７ｂｐ，相似性８４％，编码３３８个氨基酸，相似性为９２％。蛋白分子量分别为３６．６５和３６．９１ｋＤａ，理论等电点为６．３４和６．６７，均属稳定蛋白；三级结构预测表明两者和水稻（２ｅ５ｒＣ）ＧＡＰＣ 蛋白结构相似，具有ＧＡＰＣ 保守功能域。多种植物犌犃犘犆基因的序列进化分析表明同科属植物的同源性较高可归于同一分支，与现有的分类系统相对应。以ｐＢＩ１２１为基础载体，构建了由ＣａＭＶ３５Ｓ启动GAPC 基因的植物表达载体，导入农杆菌ＥＨＡ１０５，经ＰＣＲ检测确定获得阳性克隆。本研究为获得转GAPC 基因的材料并进一步研究ＧＡＰＣ 在逆境中的功能奠定基础。

Cloning and analysis of the cytosolic glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPC) gene from Solanum tuberosum and Arabidopsis thaliana