| CryⅢA 基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化简 |
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| 引用本文： | 尤佳,张宁,文义凯,吴家和,司怀军,王蒂.CryⅢA 基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化简[J].草业学报,2014,23(1):248-256. |
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| 作者姓名： | 尤佳 张宁 文义凯 吴家和 司怀军 王蒂 |
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| 摘 要： | 利用Ｉｎ-Ｆｕｓｉｏｎ技术将酶切位点不匹配、目的基因内部含载体酶切位点的CRY ⅢA 基因和植物表达载体ｐＢＩ１２１相连接，分别成功构建了组成型启动子ＣａＭＶ３５Ｓ和马铃薯茎叶特异表达启动子ＳＴ-ＬＳ１驱动的CRY ⅢA 基因植物表达载体。利用冻融法将２个重组质粒转入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４，转化马铃薯栽培品种陇薯３号和甘农薯２号获得了转化植株，经卡那霉素筛选和ＰＣＲ 测，共有１０株阳性植株CRY ⅢA 基因成功整合到马铃薯基因组中。经实时荧光定量ＰＣＲ 检测表明，CRY ⅢA 基因在ＣａＭＶ３５Ｓ驱动的CRY ⅢA 转基因植株的根、茎、叶中均有表达，且在叶中表达量较高，茎和根次之；在马铃薯茎叶特异表达启动子ＳＴ-ＬＳ１驱动的CRY ⅢA 转基因植株中，在根中未见表达，仅在茎、叶中表达，且在叶中表达量较高。
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| 关 键 词： | Ｉｎ-Ｆｕｓｉｏｎ CRY ⅢA 基因 表达载体 马铃薯 遗传转化 |
| 收稿时间： | 2013-01-07 |
Construction of a plant expression vector of the CryⅢA gene and its genetic transformation in potato |
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| YOU Jia,ZHANG Ning,WEN Yi-kai,WU Jia-he,SI Huai-jun,WANG Di.Construction of a plant expression vector of the CryⅢA gene and its genetic transformation in potato[J].Acta Prataculturae Sinica,2014,23(1):248-256. |
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| Authors: | YOU Jia ZHANG Ning WEN Yi-kai WU Jia-he SI Huai-jun WANG Di |
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