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橡胶树白粉病菌分子检测技术的建立
引用本文:毛宇宁,梁鹏,刘文波,林春花,缪卫国,郑服丛. 橡胶树白粉病菌分子检测技术的建立[J]. 植物保护, 2016, 42(4): 119-123. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1542.2016.04.019
作者姓名:毛宇宁  梁鹏  刘文波  林春花  缪卫国  郑服丛
作者单位:海南省热带生物资源可持续利用重点实验室/海南大学环境与植物保护学院,海口,570228
基金项目:国家“973”计划项目(2011CB111612); 国家现代农业产业技术体系(CARS-34-GW8); 国家自然科学基金(31160359); 教育部博士点基金(20104601110004); 海南大学科研启动资金(kyqd1006)
摘    要:根据橡胶树白粉菌(Oidium heveae Steinm.)基因组中的特有保守序列OHS,设计两对特异性引物OHF1/OHR1和OHF2/OHR2。以不同地区收集的6份O.heveae(OH1~OH6)和橡胶树胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)等5种非靶标病原菌及健康橡胶树叶片基因组DNA为模板,建立了橡胶树白粉菌PCR及nested-PCR分子检测技术,并验证了检测体系的特异性和灵敏度。结果表明,引物OHF1/OHR1和OHF2/OHR2对橡胶树白粉菌均具有较高的特异性和灵敏度。其中引物OHF2/OHR2能检测到10pg/μL的橡胶树白粉菌DNA,而以OHF1/OHR1和OHF2/OHR2组合进行nested-PCR,其最低DNA检测浓度达到0.01fg/μL。人工接种试验中,当孢子接种量为2×10~3个/叶时,PCR和nested-PCR检测体系可分别在接种4d和24h后检测到目的条带。表明nested-PCR对在叶片组织中处于潜育期的橡胶树白粉菌的检测更有效,可为橡胶树白粉菌的检测提供一种简便而准确的检测方法。

关 键 词:橡胶树白粉病菌  潜育期  分子检测
收稿时间:2015-10-30
修稿时间:2016-03-03

PCR and nested-PCR for the molecular detection of Oidium heveae Steinm.
Mao Yuning,Liang Peng,Liu Wenbo,Lin Chunhu,Miao Weiguo,Zheng Fucong. PCR and nested-PCR for the molecular detection of Oidium heveae Steinm.[J]. Plant Protection, 2016, 42(4): 119-123. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1542.2016.04.019
Authors:Mao Yuning  Liang Peng  Liu Wenbo  Lin Chunhu  Miao Weiguo  Zheng Fucong
Affiliation:Hainan Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bio-Resources, College of Enviromental and Plant Protection, Hainan University, Haikou 570228, China
Abstract:
Keywords:Oidium heveae   incubation period   molecular detection
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