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中国禽呼肠孤病毒番鸭分离株的纯化及其核酸与结构蛋白分析
作者姓名:刘文兴 陈枝华 游伟铭 吴宝成
作者单位:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨150001 [2]福建出入境检验检疫局,福建福州350001 [3]福建省畜牧兽医总站,福建福州350003 [4]福建农林大学动物保健研究所,福建福州350002
摘    要:将番鸭呼肠孤病毒国内分离株在番鸭成纤维细胞(DEF)上克隆纯化3次后.在鸡成纤维细胞(CEF)上增殖,收获的细胞培养物经3次冻融,采取差速离心、超速离心、非线性蔗糖密度梯度离心和脱糖处理相结合的方法进行提纯;对不同梯度区带的蛋白提取物经电镜观察、毒价(TCID50)和含毒量测定得到病毒纯化物;最后对病毒纯化物进行琼脂糖核酸电泳和SDS-PAGE蛋白电泳分析。结果,核酸电泳得到10条RNA带,分列呈“334”形式的3组,其迁移率除M3基因外无明显差异;蛋白电泳得到分子质量分别为149.0、129.0、111.0、79.0、75.0、50.0、42.0、39.0、37.0、35.9、32.0、29.0 ku的12条蛋白带,其中5个蛋白的分子质量与参考株S1133相近。该分离株具有禽类呼肠孤病毒核酸和蛋白电泳图谱的共同特征。

关 键 词:核酸 纯化 蛋白电泳 结构蛋白 分离株 白带 E蛋白 番鸭 禽呼肠孤病毒 毒价
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