| 实时荧光定量PCR检测猪细小病毒 |
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| 引用本文： | 李小康,崔保安,陈红英,魏战勇,郑兰兰,赵丽,吕晓丽.实时荧光定量PCR检测猪细小病毒[J].中国兽医学报,2008,28(10). |
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| 作者姓名： | 李小康 崔保安 陈红英 魏战勇 郑兰兰 赵丽 吕晓丽 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002
2. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家食品安全重大攻关专项基金 |
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| 摘 要： | 根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了引物和探针,从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中提取DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌JM109,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定,表明目的片段已经成功克隆.将104～108拷贝反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系.动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度为102拷贝.本方法的建立为猪细小病毒感染的早期诊断奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 实时荧光定量PCR 标准曲线 |
Detection of porcine parvovirus by quantitative real-time PCR assay |
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| LI Xiao-kang,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,WEI Zhan-yong,ZHENG Lan-lan,ZHAO li,L Xiao-li.Detection of porcine parvovirus by quantitative real-time PCR assay[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(10). |
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| Authors: | LI Xiao-kang CUI Bao-an CHEN Hong-ying WEI Zhan-yong ZHENG Lan-lan ZHAO li L Xiao-li |
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| Institution: | LI Xiao-kang,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,WEI Zhan-yong,ZHENG Lan-lan,ZHAO li,L(U) Xiao-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine parvovirus(PPV) real-time quantitative PCR standard curve |
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