|
|||||
|
|
| 新型Resilin-R5融合蛋白的大肠杆菌表达和纯化 | |
| 作者姓名： | 毛争争 柳永 孙燕 周曼 刘子铎 汤江武 |
| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物国家重点实验室;浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所;杭州师范大学钱江学院;浙江工业大学药学院; |
| 基金项目： | 浙江省农业科学院科技创新能力提升工程项目“新型载药融合蛋白制备及药物缓释性能研究”;浙江省自然科学基金项目“基于新型高弹蛋白-R5肽融合蛋白-SiO2复合纳米材料的控释给药系统的构建研究(LY12E03009)”;杭州师范大学钱江学院科学研究基金“抗菌肽-SiO2纳米复合材料的制备研究(2013QJJL05)” |
| 摘 要： | 为了获得兼具高弹性和硅沉积性能的新型功能生物材料,将具有高弹性的Resilin蛋白与具有硅沉积作用的R5肽进行了融合,研究其在大肠杆菌中的表达,建立了简易的纯化方法。首先,将果蝇弹性蛋白基因CG15920序列与硅藻R5肽基因序列进行拼接,经过稀有密码子优化后合成重组基因resilin-r5。然后将其插入原核表达载体pET28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS获得表达菌株,并通过IPTG进行诱导表达。最后以盐析加热法和Ni离子柱亲和层析法纯化带组氨酸标签的重组融合蛋白。最终实现Resilin-R5融合蛋白的高效表达,产量达到120 mg·L-1发酵液,为高弹性-硅沉积融合蛋白Resilin-R5的性能表征和创新应用奠定了基础。 |
| 关 键 词： | Resilin-R 融合表达 蛋白纯化 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |