鹅源坦布苏病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 |
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引用本文: | 韩凯凯,李银,黄欣梅,赵冬敏,刘宇卓,谢星星,游园.鹅源坦布苏病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[J].浙江农业学报,2014(1). |
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作者姓名: | 韩凯凯 李银 黄欣梅 赵冬敏 刘宇卓 谢星星 游园 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31172345);江苏省农业科技自主创新资金项目[cx(12)5048] |
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摘 要: | 坦布苏病毒是新发现的一种可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的黄病毒属病毒。根据GenBank中登录的鹅源坦布苏病毒NS5基因序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计1套特异识别NS5基因序列中6个不同区段的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,并以此套引物建立一种基于LAMP技术的鹅源坦布苏病毒检测方法。结果表明,该方法灵敏度极高,是普通PCR方法的100倍,只能特异性扩增坦布苏病毒的RNA,对于其他常见禽RNA病毒均无特异性扩增。在反应体系中加入SYBR GreenⅠ染料后,通过肉眼观察有无绿色荧光可直接判定结果。该方法特异性强,灵敏度高,无需特殊仪器,简便,快速,适用于鹅源坦布苏病毒的临床快速检测。
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关 键 词: | 鹅源坦布苏病毒 NS基因 环介导等温扩增 |
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