水稻低丰度表达基因OsAMT1;3实时荧光定量PCR方法的建立及其应用 |
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引用本文: | 孙淑斌,李宝珍,胡江,徐国华.水稻低丰度表达基因OsAMT1;3实时荧光定量PCR方法的建立及其应用[J].中国水稻科学,2006,20(1):8-12. |
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作者姓名: | 孙淑斌 李宝珍 胡江 徐国华 |
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作者单位: | 南京农业大学 资源与环境科学学院, 江苏 南京 210095; *通讯联系人, E-mail: ghxu@njau.edu.cn |
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基金项目: | 国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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摘 要: | 采用实时荧光定量PCR技术,通过使用特异引物,对水稻中的低丰度表达基因OsAMT1;3进行了转录水平上的定量分析,成功建立了可检测低丰度表达基因的SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台。该方法具有很好的准确性和实用性。获得的荧光定量PCR扩增曲线,基线平整,指数区明显,斜率大且固定;线性范围广,17~36个循环都能测出;稳定性、重复性好,变异系数仅为0.47%;标准曲线表明,循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系,可对基因表达进行相对定量;缺氮条件下OsAMT1;3 与纯NH4+处理相比表达量增加4倍以上。
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关 键 词: | 实时荧光定量PCR 扩增曲线 标准曲线 铵转运蛋白基因 基因表达 研究方法 |
文章编号: | 1001-7216(2006)01-0008-05 |
收稿时间: | 2005-05-23 |
修稿时间: | 2005-05-232005-09-29 |
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