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水稻低丰度表达基因OsAMT1;3实时荧光定量PCR方法的建立及其应用
引用本文:孙淑斌,李宝珍,胡江,徐国华.水稻低丰度表达基因OsAMT1;3实时荧光定量PCR方法的建立及其应用[J].中国水稻科学,2006,20(1):8-12.
作者姓名:孙淑斌  李宝珍  胡江  徐国华
作者单位:南京农业大学 资源与环境科学学院, 江苏 南京 210095; *通讯联系人, E-mail: ghxu@njau.edu.cn
基金项目:国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:采用实时荧光定量PCR技术,通过使用特异引物,对水稻中的低丰度表达基因OsAMT1;3进行了转录水平上的定量分析,成功建立了可检测低丰度表达基因的SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台。该方法具有很好的准确性和实用性。获得的荧光定量PCR扩增曲线,基线平整,指数区明显,斜率大且固定;线性范围广,17~36个循环都能测出;稳定性、重复性好,变异系数仅为0.47%;标准曲线表明,循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系,可对基因表达进行相对定量;缺氮条件下OsAMT1;3 与纯NH4+处理相比表达量增加4倍以上。

关 键 词:实时荧光定量PCR    扩增曲线  标准曲线  铵转运蛋白基因  基因表达  研究方法  
文章编号:1001-7216(2006)01-0008-05
收稿时间:2005-05-23
修稿时间:2005-05-232005-09-29
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