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猪瘟病毒E2基因真核表达载体表达效率和免疫效果的比较
引用本文:涂亦娴 张馨玉 金华利 杨福 刘明羽 张富春 王宾. 猪瘟病毒E2基因真核表达载体表达效率和免疫效果的比较[J]. 中国农业大学学报, 2005, 10(6): 37-41
作者姓名:涂亦娴 张馨玉 金华利 杨福 刘明羽 张富春 王宾
作者单位:1. 新疆大学,生命科学与技术学院/新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046
2. 中国农业大学,农业生物技术国家重点实验室,北京,100094
3. 新疆大学,生命科学与技术学院/新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046;中国农业大学,农业生物技术国家重点实验室,北京,100094
基金项目:国家高技术研究发展计划资助项目(2003AA241110和2004AA213102);国家自然科学基金资助项目(30271220)
摘    要:比较猪瘟病毒E2基因的真核表达质粒proVAX-E2n和pVP22-E2n体外表达效率以及体内的免疫效果,以从中选出高效的猪瘟病毒核酸疫苗.将上述表达载体转染Hela细胞进行体外表达后,用RT-PCR和间接ELISA法检测Hela细胞体内和体外表达产物;免疫6~8周龄昆明白小鼠, 用间接ELISA法和MTS法检测小鼠血清中CSFV特异性IgG抗体水平以及脾脏中淋巴细胞增殖功能.结果表明2种E2重组质粒均能在Hela细胞中正确表达,且proVAX-E2n的E2蛋白表达量(OD值为0.575 4)明显高于pVP22-E2n(OD值为0.306 05)(P〈0.05);proVAX-E2n刺激机体产生的抗体水平(最高抗体滴度为1:2 200)显著高于pVP22-E2n免疫组(最高抗体滴度1:1 600);淋巴细胞增殖结果显示proVAX-E2n(刺激指数4.073)与pVP22-E2n(刺激指数2.205)相比,能诱发小鼠产生更强的CSFV的特异性淋巴细胞增殖反应.本研究表明proVAX真核表达载体对E2基因体外表达效率和小鼠免疫效果均高于pVP22真核表达载体.

关 键 词:真核表达 猪瘟病毒 E2n基因 抗体 淋巴细胞增殖
文章编号:1007-4333(2005)06-0037-05
收稿时间:2005-03-04
修稿时间:2005-03-04

Comparisons of the expression efficiencies and immune effects of two eukaryotic vectors encoding CFSV E2 gene
Tu Yixian,Zhang Xinyu,Jin Huali,Yang Fu,Liu Mingyu,Zhang Fuchun,Wang Bin. Comparisons of the expression efficiencies and immune effects of two eukaryotic vectors encoding CFSV E2 gene[J]. Journal of China Agricultural University, 2005, 10(6): 37-41
Authors:Tu Yixian  Zhang Xinyu  Jin Huali  Yang Fu  Liu Mingyu  Zhang Fuchun  Wang Bin
Affiliation:1. Key Laboratory for Bioresouroes and Bioengineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urmuqi 830046, Xinjieng, China; 2. State Key Laboratory for Agrobiotechnology, China Agricultural University, Beijing 100094, China
Abstract:
Keywords:eukaryotic expression   CSFV   E2 gene   antibody   lymphocytes proliferation
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