副鸡禽杆菌lpxM蛋白的原核表达及免疫原性研究 |
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引用本文: | 梁之瑄,梅晨,张雪,徐浩钧,支岩,李焕荣,王宏俊.副鸡禽杆菌lpxM蛋白的原核表达及免疫原性研究[J].中国畜牧兽医,2024(2):719-727. |
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作者姓名: | 梁之瑄 梅晨 张雪 徐浩钧 支岩 李焕荣 王宏俊 |
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作者单位: | 1. 北京农学院动物科学技术学院;2. 北京市农林科学院畜牧兽医研究所;3. 河北北方学院 |
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基金项目: | 北京市自然科学基金(6212009); |
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摘 要: | 【目的】探究副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)外膜蛋白lpxM的免疫原性,为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。【方法】构建pET-28a-lpxM原核表达载体,经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,并对诱导时间和诱导浓度进行优化,用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Western blotting鉴定重组蛋白的特异性。将重组蛋白与MONTANIDEISA 71 VG佐剂制备成疫苗v-lpxM,通过动物试验观察重组蛋白的免疫效果。【结果】重组质粒pET-28a-lpxM转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达,在37 ku处有目的蛋白特异性条带,在37℃、700 mmol/L IPTG、诱导4 h时蛋白表达量最高;重组蛋白lpxM在上清和沉淀中均有表达,且在沉淀中表达量相对较高;Western blotting结果显示,C型副鸡禽杆菌Modesto株的阳性鸡血清与纯化后的重组蛋白可发生免疫反应。免疫保护试验结果显示,v-lpxM疫苗对A、B和...
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关 键 词: | 副鸡禽杆菌 lpxM蛋白 原核表达 免疫原性 |
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