| 检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立 |
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| 引用本文： | 吴建祥,饶黎霞,陈浙,傅帅,周雪平. 检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立[J]. 植物保护学报, 2017, 44(6): 1024-1032 |
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| 作者姓名： | 吴建祥 饶黎霞 陈浙 傅帅 周雪平 |
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| 作者单位： | 浙江大学, 水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所, 杭州 310058,浙江大学, 水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所, 杭州 310058,浙江大学, 水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所, 杭州 310058,浙江大学, 水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所, 杭州 310058,浙江大学, 水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所, 杭州 310058 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划（2014CB138400），国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08009003-001)，国家现代农业产业技术体系建设专项（nycytx-001） |
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| 摘 要： | 由白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)传播的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice blackstreaked dwarf virus,SRBSDV)是目前我国南方水稻上危害最严重的病毒,为开发简便、快速、准确的SRBSDV病毒检测技术和检测试剂,以感染SRBSDV的植物粗提液为免疫原,利用杂交瘤技术制备了2株抗SRBSDV的单抗(14A8和15G6),并利用制备的单抗建立了可快速、特异、灵敏地检测SRBSDV的胶体金免疫试纸条。结果表明,2株制备单抗的抗体类型及亚类均为Ig G1、kappa链,单抗腹水的间接ELISA效价均达到10~(-7);Western blot分析表明,2株单抗均与SRBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应,而不与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)反应。以制备14A8和15G6单抗分别为捕获抗体和胶体金标记抗体,开发成能在5 min内准确、特异地检测水稻植物和白背飞虱传毒介体体内SRBSDV的胶体金免疫试纸条;灵敏度分析表明,该检测试纸条的检测水稻病叶的灵敏度达到1∶6 400倍(g/m L),检测单头携毒白背飞虱的灵敏度达到1∶51 200倍(单头/μL)。田间样品检测结果表明,该试纸条的检测结果与RT-PCR的符合率达到100%。建立的SRBSDV胶体金免疫试纸条可对南方水稻黑条矮缩病毒进行快速、特异、灵敏的诊断和检测。
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| 关 键 词： | 南方水稻黑条矮缩病毒 单克隆抗体 胶体金免疫试纸条 白背飞虱 |
| 收稿时间： | 2016-10-13 |
Development of colloidal gold immunochromatographic strip for detecting Southern rice black-streaked dwarf virus |
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| Wu Jianxiang,Rao Lixi,Chen Zhe,Fu Shuai and Zhou Xueping. Development of colloidal gold immunochromatographic strip for detecting Southern rice black-streaked dwarf virus[J]. Acta Phytophylacica Sinica, 2017, 44(6): 1024-1032 |
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| Authors: | Wu Jianxiang Rao Lixi Chen Zhe Fu Shuai Zhou Xueping |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China and State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Southern rice black-streaked dwarf virus monoclonal antibody colloidal gold immunochromatographic strip white-backed planthopper |
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