| 巴氯芬人工抗原的合成及其鼠源多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王 耀,曹金博,胡骁飞,等.巴氯芬人工抗原的合成及其鼠源多克隆抗体的制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2021,49(11):46-52. |
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| 作者姓名： | 王 耀 曹金博 胡骁飞 等 |
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| 作者单位： | 河南科技大学 食品与生物工程学院;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室;西北农林科技大学 动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31702218）；河南省科技攻关项目（182102110445）；河南省自然科学基金项目（182300410038）；河南省青年人才托举工程项目（2020HYTP029）；河南省动物免疫学重点实验室开放课题（PKLAI20170603）；河南省农业科学院科研发展专项资金项目（2019CY04）；国家级大学生创新创业训练计划项目（202010464024） |
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| 摘 要： | 【目的】合成巴氯芬（baclofen，BA）人工抗原并制备其多克隆抗体，为巴氯芬免疫学快速检测方法的建立奠定基础。【方法】采用碳二亚胺（EDC）法将BA分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）偶联，合成免疫抗原BA-BSA和包被抗原BA-OVA，通过紫外扫描和SDS PAGE凝胶电泳鉴定其偶联效果。将免疫抗原BA-BSA免疫BALB/c小鼠，利用间接ELISA、间接竞争ELISA及交叉反应试验分别对所获多克隆抗体的效价、敏感性、特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳结果表明人工抗原偶联效果良好。ELISA结果表明，多克隆抗体的效价达到1∶256 00，半数抑制浓度（IC50）为22.33 ng/mL，且与巴氯芬结构类似物及其他瘦肉精类药物（γ-氨基丁酸、氯丙那林、可乐定、赛庚啶、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺）交叉反应率均小于0.3%，具有良好的敏感性和特异性。【结论】成功合成了巴氯芬人工抗原，并制备了免疫学特性良好的巴氯芬鼠源多克隆抗体。
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| 关 键 词： | 巴氯芬 人工抗原 多克隆抗体 ELISA |
| 收稿时间： | 2020/11/18 0:00:00 |
Synthesis of baclofen artificial antigen and preparation of murine polyclonal antibody |
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| WANG Yao,CAO Jinbo,HU Xiaofei,et al.Synthesis of baclofen artificial antigen and preparation of murine polyclonal antibody[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2021,49(11):46-52. |
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| Authors: | WANG Yao CAO Jinbo HU Xiaofei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | baclofen artificial antigen polyclonal antibody ELISA |
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