| 嗜水气单胞菌UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶的性质 |
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| 引用本文： | 龚霞,陆承平,姚火春. 嗜水气单胞菌UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶的性质[J]. 中国水产科学, 2008, 15(1): 106-112 |
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| 作者姓名： | 龚霞 陆承平 姚火春 |
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| 作者单位： | 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 江苏省攻关(三药)项目 |
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| 摘 要： | 通过水生动物源性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila，Ah）强毒株J-1株与弱毒株MR-1株抑制差减杂交得到gneJ差减片段，该片段与创伤弧菌（Vibrio vulnificus）和人源嗜水气单胞菌的UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶基因有较高的同源性。扩增完整的gneJ基因，进行分布检测并将其克隆至质粒pET32a（＋），在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中进行异源表达，SDS-PAGE结果显示，重组表达蛋白的分子量约59．7kD，与理论推测值基本相同。酶活性分析表明，该重组蛋白可将UDP-乙酰葡萄糖胺转化为UDP-乙酰半乳糖胺，确证gneJ基因编码蛋白为UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶。Western Blot分析显示，嗜水气单胞菌J-1株胞外产物的兔抗血清可识别该重组蛋白，表明该蛋白与天然蛋白有相同的抗原性。以重组蛋白为免疫原，对小鼠进行动物保护实验，结果显示，该重组蛋白对小鼠有60％的保护率，证明UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶可作为亚单位疫苗的侯选成分。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 差向异构酶基因 克隆表达 抗原性分析 嗜水气单胞菌 乙酰半乳糖胺 葡萄糖胺 差向异构 酶基因 克隆 表达 酶的性质 enzyme characteristics gene expression 成分 亚单位疫苗 保护率 保护实验 动物 小鼠 免疫原 抗原性 |
| 文章编号： | 1005-8737-（2008）01-0106-07 |
| 收稿时间： | 2007-03-30 |
| 修稿时间： | 2007-05-30 |
Cloning and expression of UDP N-acetylgalactosamine 4-epimerase gene from Aeromonas hydrophila and characteristics of the enzyme |
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| GONG Xia,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun. Cloning and expression of UDP N-acetylgalactosamine 4-epimerase gene from Aeromonas hydrophila and characteristics of the enzyme[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2008, 15(1): 106-112 |
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| Authors: | GONG Xia LU Cheng-ping YAO Huo-chun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila UDP N-Acetylgalactosamine 4-Epimerase cloning and expression antigenicity analysis |
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