秀丽隐杆线虫去饱合酶FAT1基因密码子优化及真核表达载体构建 |
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引用本文: | 倪凤娥,陆小冬,杨鹏华.秀丽隐杆线虫去饱合酶FAT1基因密码子优化及真核表达载体构建[J].畜牧与兽医,2012,44(10). |
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作者姓名: | 倪凤娥 陆小冬 杨鹏华 |
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作者单位: | 长江大学生命科学学院/长江中游湿地农业教育部工程研究中心,湖北荆州,434025 |
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基金项目: | 农业生物技术国家重点实验室开放课题 |
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摘 要: | ω-3长链多不饱和脂肪酸对人体的营养和健康具有重要意义,一旦缺乏将会引起人类各种疾病。去饱和酶FAT1基因是在线虫中合成ω-3长链多不饱和脂肪酸最关键的基因。为了对FAT1基因的密码子进行优化,并构建一个真核表达载体,利用JCat软件对FAT1基因进行了密码子优化,得到一个优化后的基因FAT1m。设计突变引物,利用重叠PCR法拼接全长FAT1m基因,并连接到pBudCE载体中。结果表明:FAT1m基因的16个密码子被改造,包括Val 2个,Ser 2个,Gln 8个,Leu 4个,但是并没有改变氨基酸序列。并且把FAT1m基因连接到pBudCE载体,成功构建了真核表达载体pBud-FAT1m。
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关 键 词: | FAT1基因 密码子优化 真核表达 |
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