| 胰腺特异性表达载体PDX1-eGFP构建及体外验证 |
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| 引用本文： | 杨希祥,魏静,宋小凤,石宁宁,冯冲,臧荣鑫,潘登科,李娟.胰腺特异性表达载体PDX1-eGFP构建及体外验证[J].畜牧与兽医,2015(3):77-80. |
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| 作者姓名： | 杨希祥 魏静 宋小凤 石宁宁 冯冲 臧荣鑫 潘登科 李娟 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物科技学院;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室;西北民族大学生命科学与工程学院 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(2011CBA01004);西北民族大学研究生科研创新项目资助(ycx14167) |
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| 摘 要： | 为了研究胰腺发育与缺陷的转基因特异性表达系统,探索胰腺特异性表达载体的构建并进行体外验证。以增强型绿色荧光蛋白(e GFP)为报告基因,小鼠PDX1启动子为特异性启动元件,构建胰腺特异性启动e GFP表达载体PDX1-e GFP,载体转染MIN-6胰岛β细胞和猪耳成纤维细胞,培养48 h后,进行荧光观察和RT-PCR、Western blot检测。结果显示,e GFP在MIN-6胰岛β细胞中的RNA水平和蛋白水平均表达,而在非胰腺细胞猪耳成纤维细胞中均不表达。本研究结果表明,成功获得胰岛特异性表达载体PDX1-e GFP,为构建相关基因在胰腺中特异性表达的载体提供依据,为制备胰腺缺陷动物奠定基础。
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| 关 键 词： | 胰腺特异性表达 PDX1启动子 MIN-6胰岛β细胞 体外验证 |
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