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利用体外特异位点重组反应构建黄瓜灰霉菌cDNA文库
引用本文:黄炜,张宁,龙松华,邱德文,王纯利. 利用体外特异位点重组反应构建黄瓜灰霉菌cDNA文库[J]. 新疆农业大学学报, 2005, 28(2): 1-4
作者姓名:黄炜  张宁  龙松华  邱德文  王纯利
作者单位:1. 新疆农业大学,资源与环境学院,乌鲁木齐,830052
2. 中国农业科学院,农业环境与可持续发展研究所,北京,100081
3. 湖南农业大学,农学院,长沙,410128
基金项目:“973”项目(2003CB114204)
摘    要:体外特异位点重组技术应用于cDNA文库的构建,克服了传统文库构建方法中的常见问题。本研究利用这一技术,以能够分离得到植物激活蛋白的黄瓜灰霉菌(B.cinerea)菌株为材料,用TRIZOL试剂提取总RNA,从中分离纯化出mRNA,用预先接有attB2位点的Oligo(dT)引物和SuperScriptTMⅡ反转录酶合成cDNA,双链cDNA与attB1接头连接,经重组、转化后构建了其cDNA文库。文库滴度为2.3×106pfu/mL,文库总容量达2.53×107。随机挑取24个克隆,经酶切检测,平均插入片断为1466bp,重组率达100%。

关 键 词:黄瓜灰霉菌  cDNA文库  体外特异位点重组
文章编号:1007-8614(2005)02-0001-04
修稿时间:2005-04-20

Construction of cDNA library of B. cinerea by in vitro site-specific recombination reaction
HUANG Wei,ZHANG Ning,LONG Song-hua,QIU De-wen,WANG Chun-Li. Construction of cDNA library of B. cinerea by in vitro site-specific recombination reaction[J]. Journal of Xinjiang Agricultural University, 2005, 28(2): 1-4
Authors:HUANG Wei  ZHANG Ning  LONG Song-hua  QIU De-wen  WANG Chun-Li
Affiliation:HUANG Wei~1,ZHANG Ning~2,LONG Song-hua~3,QIU De-wen~2,WANG Chun-li~1
Abstract:
Keywords:Botrytis cinerea  cDNA library  in vitro site-specific recombination
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