浊度法测定维生素C注射液细菌内毒素含量

应用BET-32型细菌内毒素测定仪定量测定维生素C注射液的细菌内毒素含量，干扰试验表明，维生素C注射液在400倍稀释时，测定内毒素的干扰最小。7个不同批号的维生素C注射液测定结果显示，7批的回收率均符合测定要求，其中4个批号的人用维生素C注射液内毒素含量符合药典标准，兽用3个批号产品的内毒素含量偏高。     

D-Dimer Improves the Prognostic Value of Combined Clinical and Laboratory Data in Equine Gastrointestinal Colic

The discriminating ability of 15 parameters alone or in combinations, including results from analysis of plasma endotoxin, the Nycomed plasma D-Dimer test and phospholipase A₂, were analyzed to predict morbidity and mortality in equine gastrointestinal colic. Endotoxaemia was a characteristic feature of the colic horses. The problem of adequately predicting non-survivors among colic horses required several parameters to be included in the logistic model: if the “classical parameters”, (heart rate, respiratory rate, PCV, anion gap) were included in the model, addition of plasma D-dimer, phospholipase A₂, and Cl^- significantly improved the predictive value of the logistic model. Increasing heart rate and D-dimer together with decreasing chloride was a risk factor for nonsurvival. The sensitivity of this three-parameter logistic model to predict nonsurvival was 78% and specificity 77%. The Nycomed D-Dimer test is recommended as a horse-site test to predict disseminated intravascular coagulation and nonsurvival in equine colic.     

内毒素介导动物急性肾功能衰竭机理的试验研究

为了阐明内毒素介导急性肾功能衰竭的机理,观察了内毒素性肾功能衰竭家兔血液凝固性变化和肾脏的病理形态学变化。与对照组家兔比较,模型组家兔血小板计数和血浆纤维蛋白原含量极显著降低(P<0 01),出血时间、凝血时间、凝血酶原时间和白陶土部分凝血活酶生成时间显著或极显著延长(P<0 05,P<0 01)。另一方面,内毒素注射在全部模型组家兔导致了弥漫性血管内凝血,71.4%的肾小球中发现了微血栓,肾小球纤维素密度指数达60 6%。此外,96.2%的肾小管上皮细胞变性坏死,84.1%的肾小管中有管型形成。对照组家兔均未发现这些病理变化。上述试验结果揭示,内毒素引发了弥漫性血管内凝血,而肾小球毛细血管内广泛形成的微血栓阻断了肾小球毛细血管血流,从而导致肾小球滤过率降低,这是内毒素介导急性肾功能衰竭的首要机理。此外,肾小管上皮细胞的变性、坏死可损害其重吸收和分泌功能,管型形成可阻塞肾小管管腔并增大肾球囊内的压力,这些也都是在内毒素介导急性肾功能衰竭发生发展过程中起重要作用的因素。     

内毒素对大鼠小肠黏膜组织的影响及多价阳离子A的保护效应

旨在揭示大肠埃希菌内毒素(ET)对大鼠小肠黏膜的结构、绒毛长度、上皮内淋巴细胞(IEL)的数量和分布的影响,并探讨多价阳离子A(CA)对上述指标的保护效应。选用72只140g~150g SPF级SD大鼠随机分为3组,即对照组、ET组和CA保护组,经相应处理后分别在3、4、8、12h采集十二指肠、空肠组织作为检测样本,制备病理组织切片,HE染色并利用图像分析系统进行分析。ET组十二指肠和空肠绒毛长度在3、4、8、12h均显著低于对照组和CA保护组(P0.01),ET组十二指肠、空肠IEL数量在3、4、8、12h均显著低于对照组(P0.01);CA保护组十二指肠和空肠IEL数量在4、8、12h均显著高于ET组(P0.01)。结果显示,ET在不同程度上能够破坏小肠黏膜的正常组织结构,降低小肠绒毛长度,减少IEL的数量,从而影响小肠正常的吸收和免疫功能,而CA则能明显降低ET所导致的毒性作用,发挥其保护效应。     

重组猪抑制素蛋白质中毒素残留检测及其理化稳定性

为探索纯化的重组猪抑制素蛋白质毒素残留情况以及重组猪抑制素蛋白质稳定性,本研究利用鲎试剂、气相色谱和SDS-PAGE方法对重组猪抑制素蛋白质中的细菌内毒素、β-巯基乙醇的残留量及其蛋白质在不同温度、极端p H值和反复冻融条件下的稳定性进行检测。结果显示,经过3次等电点沉淀洗涤后,重组猪抑制素蛋白质中细菌内毒素和β-巯基乙醇的残留量大幅减少。通过在不同温度下的处理发现,重组猪抑制素蛋白质在4℃环境下较稳定,可以长期保存;但在37℃时,稳定性快速下降,随着温度上升而降解加速。通过极端p H值和反复冻融试验发现,重组猪抑制素蛋白质对极端p H值和反复冻融具有较好的耐受性。     

Plasma lipopolysaccharide elevations in cattle associated with early-stage infection by Fasciola hepatica

Fasciolosis is an endemic zoonotic parasitic disease with significant impacts on human health and both animal health and production. Early post-infection impacts on the host remain unclear. The objective of this study was to determine the changes, if any, to levels of endotoxin in cattle plasma in response to early-stage infection with Fasciola hepatica. Thirty-six (36) commercial bred cattle were experimentally infected with approximately 400 viable metacercariae. Plasma lipopolysaccharide (endotoxin) levels were examined on 24 occasions from 0 h before infection to 336 h after infection using the Limulus Amoebocyte Lysate chromogenic end point assay and compared with that of six (6) uninfected control animals. Peak lipopolysaccharide levels in infected animals were reached at 52 h after infection and returned to pre-infection levels at time 144 h after infection. Infected animals had significantly elevated lipopolysaccharide levels between 24 and 120 h after infection when compared to uninfected animals. The mean change in endotoxin units (EU)/mL over time after infection was statistically significant in infected animals. Elevations of lipopolysaccharide occurred in all infected animals suggesting a possible repeatable and titratable endotoxemia conducive to therapeutic agent model development.     

内毒素对兔红细胞膜磷脂含量的影响及阳离子A对其的拮抗效应

利用高效液相色谱法分别测定正常对照组（Ⅰ组）、内毒素组（Ⅱ组）和内毒素＋阳离子A拮抗组（Ⅲ组）中兔红细胞膜磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰肌醇（PI）含量。结果显示，Ⅱ组中除PE在处理后0．5h没有明显变化外（P〉0．05），PC、PE、PS、PI含量在0，5、1、3、5、7h均低于Ⅰ组（P〈0.05，P〈0．01）；而Ⅲ组中除PS、PE和PI在处理后0．5h、PC在1h、PI在3h没有明显变化外（P〉0．05），整个时间段中上述4种磷脂的含量均高于Ⅱ组（P〈0．05，P〈0．01）。可见，内毒素能使兔红细胞膜磷脂含量降低，而阳离子A在一定程度上具有对内毒素的拮抗作用和对红细胞膜的保护效应。     

硫酸链霉素细菌内毒素定量测定法的研究

应用鲎试剂动态浊度法，将硫酸链霉素制备成4、2、1、0．5mg／mL溶液，定量添加标准内毒素进行干扰预试验，计算回收率，确定不干扰浓度为0．5—2mg／mL。从中选出1mg／mL为最佳浓度，然后进行3个批次硫酸链霉素正式干扰试验。在供试品中定量添加标准内毒素，其回收率分别为125．8％、126．1％、127．3％，均在50％-200％之间，说明此浓度的供试品对鲎试剂反应无干扰作用。因此，内毒素含量在0．015—1EU／mL范围内，将硫酸链霉素制备成浓度为1．0mg／mL的溶液，可用于细菌内毒素的定量检测。     

山莨菪碱(654-2)对内毒素诱导山羊红细胞膜损伤过程中膜脂流动性的影响

用1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene, DPH)分子荧光偏振技术,研究了内毒素(ET)诱导的山羊红细胞膜(ECM)损伤过程中膜脂的流动性(P)、膜脂区微粘度(-η)、脂双层分子排列有序性系数(A)的变化及山莨菪碱(654-2)对其的影响。结果表明,ET 处理组(Ⅱ组)ECM 的P、-η和A 参数在处理后3、5、7、9、12 h 均显著高于Ⅰ组和Ⅲ组(P< 0.05,P< 0.01);Ⅲ组P、-η和A 参数在处理后3 h 显著低于Ⅰ组(P< 0.01), 5、7 h 高于Ⅰ组(P< 0.05,P < 0.01)。结果显示,ET可使山羊ECM P、-η和A 增加、膜流动性降低,而654-2 能有效地改善ET诱导的这些损伤变化,支持了654-2 具有维护膜结构和功能的理论。