利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究

选择葡萄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase)基因VviPDS1为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除载体,瞬时转化葡萄叶片原生质体,检测到不同类型的突变。通过农杆菌介导转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织,筛选获得卡那霉素抗性植株71株。经PCR鉴定,其中53株为阳性植株,阳性率为74.64%。测序结果表明,共有20株在靶点发生不同类型的突变,编辑效率为37.74%;其中9株产生了双等位基因突变。对其进行氨基酸序列预测,在第202位氨基酸之后发生了不同程度的变异。利用CRISPR/Cas9系统敲除VviPDS1获得的突变体植株呈现整体矮化,其叶片出现不同程度白化。表明CRISPR/Cas9系统可以通过细胞中的瞬时或稳定表达进行基因编辑,可以实现在葡萄编辑植株中产生纯合敲除。     

基于PDS的Projec tserver与Sharepoint二次开发

本文采用PDS提供的API开发工具对项目管理软件Project以及Sharepoint进行二次开发,使用磷语言编程配合PDSAPI实现对Project server和Sharepoint软件中的数据进行整合;并通过一个具体的实例描述了二次开发的过程。     

基于APDL参数化建模的轴系可靠性

运用大型通用有限元软件ANSYS提供的PDS模块,以泵轴的几何尺寸、载荷、应力、弹性模量以及强度极限等参数作为随机输入变量,根据应力-强度干涉理论,建立极限状态函数;通过APDL参数化设计语言,建立泵轴参数化三维实体模型,根据实际受载情况,对泵轴进行静应力分析,生成概率分析文件,选用蒙特卡罗有限元方法和拉丁抽样法对泵轴进行可靠度设计,得到比传统设计方法精度高、易于实现的泵轴失效概率及可靠度.以HS1K型碱泵的泵轴为例进行计算,获得了碱泵的应力概率分布特征,在置信度为95%时,该泵的可靠度为99.75%.实践表明,利用ANSYS/PDS模块对泵轴进行可靠性分析,能为生产厂家改进设计提供理论依据,具有一定的工程应用价值.     

甜瓜果实八氢番茄红素脱氢酶基因（CmPDS）的克隆与表达

以甜瓜自交系‘M01-3’果实cDNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了甜瓜果实八氢番茄红素脱氢酶（PDS）基因cDNA全长序列,命名为CmPDS（基因注册号：KC507802）。序列分析表明,该基因有开放阅读框1731 bp,编码576个氨基酸,与其他植物PDS氨基酸序列具有较高的同源性,尤其与黄瓜、南瓜、苦瓜PDS氨基酸序列高达92.6%~87.8%。荧光定量分析表明,该基因在甜瓜不同器官中均有表达,在叶片和授粉后25 d的果实中表达量较高,在根中表达量最低;随果实发育成熟,该基因表达量呈现先升高后降低趋势。     

Metabolomics - A robust bioanalytical approach for the discovery of the modes-of-action of pesticides: A review

The agrochemical industry is facing great undertaking that includes increasing demand for the development of new crop protection agents that are safe for the environment and the consumers, and at the same time combat the issue of the emergence of resistance pest strains. The mode-of-action (MoA) is among the features of a bioactive compound that largely determine whether the abovementioned issues are addressed or not, and subsequently whether its commercial development will be addressed. The early discovery of the MoA of bioactive compounds could accelerate pesticide research and development by reducing the required time and costs. Based on advances in synthetic and natural product chemistry, scientists have access to a vast number of compounds that could potentially be developed as crop protection agents. The screening of such compounds with respect to their MoA requires accurate and robust bioanalytical tools. Metabolomics is a powerful bioanalytical tool that will likely play a significant role in the acceleration of the discovery of MoA of bioactive compounds. In the present review, the capabilities and principles and applications of metabolomics for the study of the MoA of herbicides, insecticides, acaricides, fungicides, and antibiotics are discussed.     

羊踯躅八氢番茄红素脱氢酶基因的克隆及表达分析

旨在研究羊踯躅八氢番茄红素脱氢酶基因的功能,为其花瓣着色的分子机理研究提供一定的理论依据。以羊踯躅瓣为材料,采用RT-PCR和RACE方法从花瓣cDNA中克隆获得到2098 bp的八氢番茄红素脱氢酶基因cDNA序列,命名为RmPDS。序列分析表明,RmPDS基因包含一个长度为1743 bp编码580个氨基酸的开放阅读框。利用NCBI分析该基因的氨基酸序列,Blast序列分析结果显示RmPDS与其他植物PDS蛋白氨基酸的相似性达到87.80%。用MEGA软件构建系统进化树,结果显示羊踯躅PDS与茶树PDS蛋白的亲缘关系最近。荧光定量PCR检测结果表明RmPDS基因在羊踯躅花蕾期和膨大期表达量较低,在初花期表达量最高,盛花期表达量有所降低。RmPDS基因参与羊踯躅花色的形成,研究结果为进一步探究该基因在花色形成中的作用机制奠定基础,同时也为构建杜鹃VIGS体系提供报告基因。     

人参二醇组皂苷的降糖作用研究

通过皮下注射肾上腺素和高脂饮食伴小剂量链尿菌素建立实验性高血糖模型,测定人参二醇组皂苷治疗性给药后动物的空腹血糖值及肝糖原含量。结果表明,人参二醇组皂苷50、100、200mg/kg对皮下注射肾上腺素所致的小鼠高血糖及舌下静脉注射链尿菌素引起的大鼠高血糖均有明显降低作用,并可提高肾上腺素所致高血糖小鼠的肝糖原含量,提示人参二醇组皂苷对实验性高血糖具有降低作用。     

PDS异常工况分析与技术改进措施

概述了陕京输气管道大功率变频调速驱动系统(PDS)的构成及其应用情况,介绍了负载换相电流源型变频器(LCI)的基本原理和优点。对PDS在运行过程中发生的异常工况进行了分析,采取了有效的技术改进措施,并在保障PDS冷却系统运行和PDS滤波装置设计方面提出了建议。