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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
3.
Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) is responsible for respiratory disorders, abortion and myeloencephalopathy (EHM) in horses. Two pathotypes of EHV-1 strains are circulating in the field: neurovirulent (N) and non-neurovirulent (NN). For both strains, CD172a+ monocytic cells are one of the main carrier cells of EHV-1 during primary infection, allowing the virus to invade the horse’s body. Recently, we showed that EHV-1 NN strains showed a restricted and delayed replication in CD172a+ cells. Here we characterize the in vitro replication kinetics of two EHV-1 N strains in CD172a+ cells and investigate if the replication of these strains is similarly silenced as shown for EHV-1 NN strains. We found that EHV-1 N replication was restricted to 7–8% in CD172a+ cells compared to 100% in control RK-13 cells. EHV-1 N replication was not delayed in CD172a+ cells but virus production was significant lower (103.0 TCID50/105 inoculated cells) than in RK-13 cells (108.5 TCID50/105 inoculated cells). Approximately 0.04% of CD172a+ cells produced and transmitted infectious EHV-1 to neighbour cells compared to 65% of RK-13 cells. Unlike what we observed for the NN strain, pretreatment of CD172a+ cells with histone deacetylases inhibitors (HDACi) did not influence the replication of EHV-1 N strains in these cells. Overall, these results show that the EHV-1 replication of N strains in CD172a+ cells differs from that observed for NN strains, which may contribute to their different pathogeneses in vivo. 相似文献
4.
Protective efficacy of an H5/H7 trivalent inactivated vaccine produced from Re-11, Re-12, and H7-Re2 strains against challenge with different H5 and H7 viruses in chickens 下载免费PDF全文
ZENG Xian-ying CHEN Xiao-han MA Shu-jie WU Jiao-jiao BAO Hong-mei PAN Shu-xin LIU Yan-jing DENG Guo-hua SHI Jian-zhong CHEN Pu-cheng JIANG Yong-ping LI Yan-bing HU Jing-lei LU Tong MAO Sheng-gang GUO Xing-fu LIU Jing-li TIAN Guo-bin CHEN Hua-lan 《农业科学学报》2020,19(9):2294-2300
We developed an H5/H7 trivalent inactivated vaccine by using Re-11, Re-12, and H7-Re2 vaccine seed viruses, which were generated by reverse genetics and derived their HA genes from A/duck/Guizhou/S4184/2017(H5 N6)(DK/GZ/S4184/17)(a clade 2.3.4.4 d virus), A/chicken/Liaoning/SD007/2017(H5 N1)(CK/LN/SD007/17)(a clade 2.3.2.1 d virus), and A/chicken/Guangxi/SD098/2017(H7 N9)(CK/GX/SD098/17), respectively. The protective efficacy of this novel vaccine and that of the recently used H5/H7 bivalent inactivated vaccine against different H5 and H7 N9 viruses was evaluated in chickens. We found that the H5/H7 bivalent vaccine provided solid protection against the H7 N9 virus CK/GX/SD098/17, but only 50–60% protection against different H5 viruses. In contrast, the novel H5/H7 trivalent vaccine provided complete protection against the H5 and H7 viruses tested. Our study underscores the importance of timely updating of vaccines for avian influenza control. 相似文献
5.
CRISPR/cas是一种获得性免疫防御系统,广泛存在于细菌和古细菌中。Strep tococcus pyogenes cas9(Spcas9)作为目前研究最多、最清楚的效应蛋白,因其酶活性高和靶点广而被应用于生命科学各个领域,但Spcas9分子量大、脱靶率高等缺点在一定程度上限制了其应用。随着CRISPR系统技术被深入开发,一些新效应蛋白被发现,本文就CRISPR/cas系统分类、原理、新效应蛋白发现及cas9(S.Pyogenes)多种变构体技术开发在及家禽上的应用进行综述,为相关领域的研究提供参考。 相似文献
6.
彭景翠 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1990,17(1)
1985年Koda等人发现聚丁二炔在光的照射下,会发生从兰色到红色的变化;掺杂不同时,其光吸收出现了一系列新的特征,并在有机光导,非线性光学层,电子束复印材料等方面得到了应用.本文首次提出一个包括电子—电子,电子—声子相互作用的模型,成功地解释了有关实验现象. 相似文献
7.
8.
9.
地膜覆盖对棉枯萎病发生的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
地膜覆盖显著降低了棉花枯萎病的发病率与病情指数,极显著地提高了棉花的产量。 相似文献
10.
试验于1990~1992年在江苏农学院实验农场进行,供试品种(系)为扬麦5号、冀845418和8874.通过在小麦开花期喷施强力增产素,研究其对小麦花后干物质生产和产量的影响。结果表明:喷施强力增产素能延缓花后叶片的衰老,提高叶片叶绿素含量,增强光合功能,扩大花后干物质积累量,具有一定的增粒、增重作用。开花期喷施,可增产6.82%~8.56%,花后20d喷施效应下降,仅增产3.73%。 相似文献