试管苗玻璃化现象的研究进展

玻璃化是植物组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变,普遍发生于多种植物中。玻璃化试管苗呈透明或半透明的水浸状,叶片卷曲畸形,分化及存活能力低,无法进行继代培养及驯化移栽,给种苗商业化生产造成了严重的经济损失,也限制了组织培养技术在种质资源保存及基因工程育种中的应用。目前,对玻璃化发生的机制尚没有统一的认识。本文对玻璃化现象、发生机制以及预防措施等相关研究进行了综述,以期为研究玻璃化发生发展的机制并开发有效的防控措施提供借鉴。     

提高观赏羽扇豆组织培养效果研究

分别采用L9（34）和L16（45）正交试验方法,研究了观赏羽扇豆组织培养过程中污染和玻璃化控制的最佳组合,探讨吸附剂（活性炭、聚乙烯吡咯烷酮）和抗氧化剂（维生素C、柠檬酸）对外植体褐化的影响。结果表明：0．1％升汞是影响外植体消毒的主要因素,0．1％高锰酸钾次之;采用0．1％高锰酸钾、70％乙醇和0．1％升汞依次消毒30 min、40 s和9 min效果较好,污染率最低为14．8％。培养基中添加活性炭2．0 g/L,培养周期控制在25 d之内,平均褐化率可控制在5．3％,效果最理想;培养基中添加柠檬酸5．0 g/L也能有效控制褐化（8．5％）,但整体效果不如活性炭。与正常苗相比,玻璃化苗组织含水量和可溶性糖含量显著升高,叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量、干物质积累和淀粉含量显著降低;温度是影响玻璃化的关键因素,培养基中添加蔗糖30 g/L和琼脂6 g/L,在20℃培养条件下,光照14 h,玻璃化率最低为3．1％。     

芍药'种生粉'离体芽培养及玻璃化苗复壮研究

以芍药品种‘种生粉'地下芽为外植体,研究不同IAA浓度、取材时间对启动培养的影响,不同6-BA浓度对丛生芽诱导的影响、不同生长素对丛生芽增殖的影响以及继代过程中玻璃化苗的复壮.结果表明:有利于地下芽的启动培养基为:1/2 MS(Ca2+加倍)+6-BA 1.0 mg·L-1+GA30.5 mg·L-1+IAA0.1 m...     

外源H2O2作用下大蒜试管苗活性氧代谢的变化及对AsA的响应

 探讨外源活性氧物质（ROS）引起试管苗玻璃化,以及活性氧清除剂对试管苗玻璃化的缓解效应和机理,以大蒜品种‘二水早’试管苗为材料,研究外源过氧化氢（H₂O₂）及H₂O₂ + 活性氧清除剂抗坏血酸（AsA）处理下试管苗玻璃化及活性氧代谢的变化。结果表明：外源H2O2处理使大蒜试管苗内源超氧阴离子产生速率和H₂O₂含量提高,玻璃化率和玻璃化程度提高。玻璃化现象的发生较内源大量发生滞后,与H₂O₂显著积累同步。外源H₂O₂处理0 ~ 8 d,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性有上升趋势并显著高于对照,但在8 d后抗氧化酶活性或者下降（SOD、CAT）,或增加缓慢（POD）,而内源抗氧化物质AsA含量在处理8 d时显著低于对照。在外源H₂O₂处理的同时添加外源AsA,因外源H₂O₂引起的内源的产生和H₂O₂的积累减少,SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性保持持续上升趋势,并在处理后期高于添加H₂O₂的处理及对照,内源AsA含量保持较高水平并显著高于外源H₂O₂处理;同时玻璃化率增加缓慢。综上所述,外源H₂O₂可提高大蒜试管苗内源的产生速率和H₂O₂含量,降低抗氧化系统的抗氧化能力,进而导致试管苗玻璃化加重;添加外源抗氧化物质AsA可缓解的产生和H₂O₂的积累,对试管苗玻璃化发生有控制效果。     

‘黄冠’梨正常试管苗与玻璃化苗生理生化及超微结构的比较研究

 以正常和玻璃化‘黄冠’梨试管苗为试材进行组培快繁、生理生化及组织结构比较研究。结果表明：玻璃化苗较正常苗增殖能力显著降低,增殖出的试管苗仍为玻璃化苗,并且玻璃化程度加重;干物质积累较正常苗低31.3%,淀粉含量低29.57%,而可溶性糖含量高13.92%;叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总含量分别降低40.16%、43.24%和39.52%;ZR、IAA、GA含量,GA/IAA和ZR/IAA均高于正常苗,而ZR/GA显著低于正常苗;叶绿体数量减少、体积变小、类囊体叠跺不整齐,细胞核畸形或缺失。碳水化合物含量较低、激素代谢紊乱、光合结构破坏及细胞核物质减少是梨玻璃化苗的重要特征,可能是后代增殖能力显著降低的主要因素。