芹菜水孔蛋白基因AgPIP2;1的克隆及其对非生物胁迫的响应

为了研究芹菜质膜内在蛋白基因的序列特征及其在非生物胁迫条件下的表达特性,探讨其抗逆功能,以芹菜品种六合黄心芹为试验材料,通过RT-PCR技术克隆AgPIP2;1基因,通过生物信息学软件分析其核苷酸和氨基酸序列特征,并采用荧光定量PCR技术检测其在不同组织的表达及其对非生物胁迫的响应。结果表明,AgPIP2;1基因含有1个861 bp的开放阅读框,编码286个氨基酸,其编码的蛋白属于PIP2类蛋白。氨基酸序列分析显示,AgPIP2;1含有高度保守的NPA基序以及高等植物PIP蛋白的保守序列,与其他物种PIP2类蛋白具有较高的同源性,与胡萝卜DcPIP2;1的氨基酸序列同源性达到97.90%。在亲缘关系上与大豆GmPIP2;1、胡萝卜DcPIP2;1和绿豆VrPIP2;1较为接近。实时荧光定量PCR技术分析表明,AgPIP2;1基因在芹菜根、叶柄和叶片中均有表达,其中在叶片中的表达量最高,在根中的表达量最低,呈现比较明显的组织特异性。此外,AgPIP2;1基因受到高温、低温、干旱和盐等非生物胁迫的诱导,说明该基因可能参与芹菜抵御非生物胁迫的过程。本研究为进一步了解AgPIP2;1基因的功能及其在非生物胁迫中的作用奠定了基础。     

超声协助提取维药芹菜籽蛋白多肽类物质的研究

采用单因素和正交试验,以磷酸盐缓冲溶液提取并用硫酸铵沉淀芹菜籽中的多肽类成分,且以不同条件下硫酸铵沉淀（80％）的多肽量为考察指标,来确定活性多肽的超声波提取最佳条件。结果表明,芹菜籽中多肽的最佳提取条件为：磷酸盐缓;中溶液pH9．0,超声提取30min,液固比5．0：1（ml：g）,提取的多肽具有较好的清除ABTS自由基的能力。关键词芹菜籽;活性多肽;超声波提取;最佳条件;抗氧化活性     

驱蚊草驱除库蠓预防鸡白冠病的应用试验

本试验采用粘蚊帖收集库蠓的方法，了解在鸡舍内和鸡舍外使用驱蚊草对库蠓的驱除作用。试验结果证明：使用驱蚊草在鸡舍外能够在1．5m范围内有效地减少库蠓的数量（P〈0．05）：放置了驱蚊草的鸡舍相比未放置驱蚊草的鸡舍其库蠓数量明显减少（P〈0．05）；另外，驱蚊草对蛋鸡的产蛋率与死淘率无明显影响。由此可见，驱蚊草有明显的驱库蠓效果，能达到预防鸡白冠病的目的，     

蚊净香草叶片离体培养研究

以蚊净香草(Pelargonium graveolens L'herit)不同叶龄的叶片为外植体进行离体培养,结果表明,只有成熟的叶片可诱导形成愈伤组织,培养基MS 6-BA 1.00mg/L NAA 0.20mg/L最适于愈伤组织的诱导、不定芽分化和丛生芽的增殖,培养基MS NAA 0.20 mg/L最适合根系诱导及幼苗生长.     

不同浓度Cr~(6+)处理下芹菜的铬累积量及生理特性

采用盆栽试验,研究了不同浓度(0、5、15、40、60mg·kg-1)K2CrO4胁迫下芹菜生物量、各器官中铬累积量和叶片Vc、硝酸盐含量变化及铬胁迫对芹菜游离脯氨酸(Pro)含量等生理特性的影响。结果表明:(1)在低浓度铬(5mg·kg-1)处理下芹菜生物量无显著变化,而中、高浓度铬(40、60mg·kg-1)处理下芹菜地上部和根部干重极显著降低(P0.01),根冠比升高,耐性指数(TI)下降。(2)不同浓度Cr6+处理下芹菜地上部和根部铬含量均极显著增加(P0.01),根部对铬有较强的滞留作用;不同浓度处理下各器官对铬的积累量均为:根叶茎。(3)随着Cr6+处理浓度增加,芹菜叶片中丙二醛(MDA)、Pro、可溶性糖、硝酸盐含量呈增加趋势;叶绿素、Vc含量及根系活力呈现下降趋势;可溶性蛋白含量在低浓度下升高,在高浓度下逐渐降低。低浓度(5mg·kg-1)Cr6+处理对芹菜未产生明显影响,中、高浓度(40、60mg·kg-1)Cr6+处理对芹菜生长发育造成一定伤害。     

铬在芹菜中的累积、亚细胞分布及化学形态分析

采用盆栽试验,研究了Cr6+处理对美国西芹和日本西芹铬总累积量及器官中铬亚细胞分布和化学形态的影响。结果表明,对照处理（0mg·kg-1 Cr6+）芹菜根部和地上部铬在亚细胞中分布为：F3（可溶部分）＞F2（细胞器及膜部分）＞F1（细胞壁及残渣）;40mg·kg-1Cr6+处理为：F1＞F3＞F2,细胞壁(F1)是铬在芹菜细胞内的主要结合位点。芹菜根部和地上部铬化学形态以醋酸提取态占优势,NaCl和HCl提取态也占较大比例。60mg·kg-1Cr6+处理下2个品种芹菜地上部和根部铬含量均极显著增加（P＜001）;相同浓度铬处理下,铬含量和总积累量为：根＞叶＞茎,日本西芹各器官中铬含量和总累积量相对高于美国西芹。2个芹菜品种对铬的吸收均以根部为主要滞留器官,以细胞壁部位为主要的亚细胞分布区域,铬在芹菜体内以难溶性磷酸盐类、蛋白结合态类和草酸盐类为主要化学形态存在形式。     

水芹和旱芹的营养成分分析

以常规方法对毕节水芹菜和旱芹菜的营养成分含量进行测定和比较分析.结果表明:水芹菜的蛋白质、维生素B1、维生素E、胡萝卜素、钾、钙、磷、铜和硒的含量均比旱芹菜高;而碳水化合物、粗纤维、维生素A、维生素C、钠、铁、镁和锌的含量则比旱芹菜低.     

Apium graveolens PI 181714 is a source of resistance to Fusarium oxysporum f. sp. apii race 4 in celery (A. graveolens var. dulce)

Celery has little genetic diversity and is highly susceptible to the new fungal pathogen Fusarium oxysporum f. sp. apii (Foa) race 4. After screening an Apium graveolens germplasm collection for resistance to Foa race 4, we crossed celery cv. 'Challenger', which is Foa race 2-resistant but Foa race 4-susceptible and A. graveolens PI 181714, which is Foa races 2- and 4-resistant but non-celery type. After selfing F₁s, we screened the F₁S₁ for race 4-resistance and celery-type and then selfed selected F₁S₁. Greenhouse and field trials indicate that three selected F₁S₂ families (76–8-4, 76–8-27 and 76–8-36) are suitable as germplasm for celery breeders for resistance to Foa race 4. A F1S3 76–8–36-124 is either fixed or nearly so for resistance to Foa races 4 and 2. Furthermore, quantitative PCR indicates that PI 181714 is resistant, rather than tolerant, to Foa races 4 and 2, and that this resistance has been introgressed into F1S3 76–8–36-124.     

芹菜NAC转录因子基因AgNAC1的克隆及其对非生物胁迫的响应

通过RT-PCR方法,从芹菜‘六合黄心芹’和‘文图拉’中分别克隆获得编码NAC转录因子的基因AgNAC1。利用生物信息学方法分析其编码氨基酸序列组成、蛋白质理化性质、亲缘关系、空间结构等,采用荧光定量PCR技术检测基因在不同非生物胁迫下的表达水平。结果表明：‘六合黄心芹’和‘文图拉’AgNAC1开放阅读框长度均为957 bp,编码318个氨基酸,其蛋白质相对分子量分别为36.89和36.77 kD,理论等电点分别为5.94和5.78。AgNAC1蛋白与不同植物中NAC家族成员同源性比对和进化树分析表明,其与胡萝卜DcNAC属于同一个分支,进化距离最近。蛋白功能域预测显示,AgNAC1有多个α螺旋和β转角二级结构单元。荧光定量PCR结果表明,AgNAC1在芹菜叶中表达量最高,具有组织特异性,同时对高温、低温、干旱和盐胁迫均有响应。‘六合黄心芹’中AgNAC1的表达水平在高温处理24 h达到最高。‘文图拉’中AgNAC1的表达水平在高温、低温及盐处理后2 h和8 h高于对照,呈现先下降后上升的趋势,在干旱处理4 h时表达水平最高。     

侵染芹菜的甜椒内源RNA病毒鉴定及序列分析

本试验利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)提取技术和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)方法对表现皱缩症状的芹菜进行分子鉴定,发现芹菜被甜椒内源RNA病毒Bell pepper alphaendornavirus(BPEV)所侵染。为进一步明确山西芹菜BPEV分离物(BPEV-QC,GenBank登录号为KY659226)的分类地位,根据SIA测序结果设计BPEV特异性引物进行RT-PCR检测,并进行序列相似性比较和系统进化分析。序列同源性分析表明:BPEV-QC与BPEV分离物(IS、Maor、Kyosuzu、BPEV、lj、BPEV-YW)的同源性为80.0%~97.8%,与其他内源RNA病毒科分离物的同源性仅为30.6%~37.6%,表明:BPEV-QC与BPEV分离物(IS、Maor、Kyosuzu、BPEV、lj)形成一个独立分支,亲缘关系最近。