An expeditious HPLC method to distinguish Aconitum kusnezoffii from related species

An optimized HPLC-DAD method aided by similarity and hierarchical clustering analysis (HCA) was applied for identification of four species of the roots of Aconitum. The unique properties of this HPLC fingerprints and HCA were validated by analyzing Aconitum kusnezoffii Rchb. (AKR) samples and related herbs including A. karacolicum Rapcs. (AKP) samples, A. austroyunnanense W.T.Wang (AAW) samples and A. contortum Finet & Gagnepain (ACF). The results revealed that the chromatographic fingerprint combining similarity measurement and hierarchical cluster analysis could efficiently identify and distinguish AKR samples from its related species.     

从文献分析看我国白芨研究进展

 利用《中文科技期刊全文数据库》等检索工具,采用文献计量法,对我国1975～2008年学术刊物上发表的白芨研究文献进行统计分析,研究年发文量、合作度、合作率、期刊分布、研究单位等指标和内容,定量分析出我国白芨研究的主要人物、研究领域、研究单位及现状,明确了各年研究的重点、热点、核心人物和主要机构,以期对我国白芨研究有全面的了解,这对白芨的进一步研究和学科的发展有重要的指导作用。     

蝴蝶兰SRAP反应体系的建立与优化

以蝴蝶兰嫩叶提取的DNA为材料,蝴蝶兰SRAP反应体系中的重要参数Mg2＋、Taq酶、模板DNA及随机引物,建立了一套适合蝴蝶兰基因扩增的SRAP反应体系：25μL的反应体系中Mg2＋浓度为2.0mmol/L,Taq酶1.0U,DNA模板40ng,上下游引物0.8mmol/L。该体系扩增条带清晰,重复性好,有望在蝴蝶兰属植物的遗传育种研究中运用。     

春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。     

春兰根内生细菌分离培养方法的初步研究

探讨了春兰根表面灭菌的最佳条件,以及改良察氏琼脂、淀粉铵营养琼脂、YG、R2A、LB、金氏、TSA和根系分泌物8种培养基对春兰根内生细菌的分离效果。结果表明:春兰根的最佳表面灭菌条件为:75%乙醇浸泡3 min,3%次氯酸钠溶液处理2 min,75%乙醇浸泡30 s,最后用无菌水冲洗。不同培养基对内生细菌的分离存在一定差异,R2A培养基和根系分泌物培养基分离出的内生细菌数量较多,而YG培养基和R2A培养基分离出的内生细菌种类总数最多。此8种培养基对春兰根内生细菌的优势菌群的分离效果是相同的。研究结果可为选择合适的表面灭菌条件及培养基分离兰花内生细菌提供参考。     

高CO2浓度对春兰叶片叶绿素·叶绿素蛋白质复合物含量的影响

[目的]为了研究春兰适应环境变化的方法。[方法]对自然状态（正常组,CO2浓度（370±50）μl/L）和高CO2浓度（试验组,CO2浓度（700±50）μl/L）春兰叶片的叶绿素及叶绿素蛋白质复合物含量进行研究。[结果]与正常组相比,试验组春兰叶片的叶绿素含量增高,叶绿素a/b降低;叶绿素蛋白质复合物的含量增加,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得到6条叶绿素蛋白质复合物带和1条游离色素带,表明叶绿素蛋白质复合物种类未发生变化。从电泳结果可以看出,叶绿素蛋白质复合物聚合态如LHCⅡ3的量增多,单体态LHCⅡ1和LHCⅡ2的量减少。[结论]叶绿素、叶绿素蛋白质复合物含量的变化是春兰对高CO2浓度的一种适应效应,有利于提高其在光合作用中光能的吸收、传递和转换的效率,并且支持高效的光合碳素同化作用。     

麝香石斛组织培养过程中生长效应及多糖含量变化

麝香石斛(Dendrobium parishii Rchb.f.)是原种石斛,具有很高的观赏价值和药用价值。试验利用组织培养技术筛选培养基合适的激素浓度,在最优条件下观察麝香石斛试管苗7~108 d的生长情况,分析麝香石斛不同生长阶段植物多糖含量的变化情况和积累规律。结果显示,麝香石斛多糖含量随培养时间的增加而提高,0~40 d增长速率较为缓慢,40~80 d增长较快,之后的多糖含量又开始趋于平缓。     

象牙白花兰种子及茎尖培养与原球茎形态发生

 象牙白花兰授粉后5 个月的种子开始具有较高的萌发率; 椰乳或适量激素有利于种子的萌发;种子在萌发后胚发育形成原球茎, 原球茎经过增殖, 分化出叶片和根系, 形成完整的小植株。从播种到小植株的形成历时约7 个月。茎尖在MS + NAA 0. 1 + BA 3. 0 (单位: mg·L^-1 , 下同) + 椰乳10 %的培养基上诱导产生原球茎; 原球茎在MS + NAA 0. 1 + BA 5. 0 的培养基上增殖, 在无激素培养基上分化成芽; 小芽在附加7 %香蕉汁和3 %马铃薯汁的1/ 2 MS 培养基上诱导出根而再生完整小植株。不同pH 值、光照强度和培养方式对增殖效果有显著影响。     

基于灰色关联度的叠鞘石斛叶抗氧化部位的筛选

以不同浓度乙醇对叠鞘石斛[Dendrobium aurantiacum Rchb. f. var. denneanum (Kerr.) Z. H. Tsi. ]叶进行提取,再用不同极性溶剂对抗氧化活性较高的60%乙醇粗提取物进行萃取,分别得到石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层,采用超高效液相色谱法（ultra performance liquid chromatography,UPLC）和紫外-分光光度法对各部位进行成分分析,以DPPH自由基清除活性为指标,利用灰色关联度进行相关性分析,筛选主要的抗氧化活性部位。其中,总黄酮在正丁醇层最高（24.89%）;多糖在水层最高（0.23%）;各萃取层均有抗氧化活性,DPPH自由基清除能力强弱顺序为水层>正丁醇层>乙酸乙酯层>二氯甲烷层>石油醚层。筛选出正丁醇层、水层为抗氧化主要活性部位,其抗氧化活性是黄酮类、多糖等成分协同作用的结果,为进一步提取抗氧化活性化合物,开发天然抗氧化剂提供一定的指导。     

北乌头提取物对舞毒蛾体内酶活性的影响

采用系统溶剂法对北乌头甲醇提取物进行分离,用饲料混药法测定4种萃取物对舞毒蛾的胃毒毒力,测定了北乌头乙酸乙酯萃取物对舞毒蛾幼虫体内解毒酶、保护酶、消化酶活力的影响。试验结果表明:北乌头乙酸乙酯萃取物杀虫作用显著,为主要杀虫活性物质;舞毒蛾幼虫经北乌头乙酸乙酯萃取物亚致死浓度(LC_(20))处理后,其体内羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性均表现为持续抑制,处理72 h,乙酰胆碱酯酶活力为对照的50.6%,抑制作用极显著(P0.01);超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性均表现为先激活后抑制,处理24 h,过氧化氢酶活力为对照的1.613倍,激活作用极显著(P0.01),处理72 h,超氧化物歧化酶活力为对照的84.2%,抑制作用极显著(P0.01);脂肪酶和淀粉酶活性均表现为持续抑制,处理72 h,脂肪酶活力为对照的53.9%,抑制作用极显著(P0.01);蛋白酶活性表现为先激活后抑制,处理24 h,蛋白酶活力为对照的1.431倍,激活作用极显著(P0.01),处理72 h,蛋白酶活力为对照的90.4%,抑制作用显著(P0.05)。综上,北乌头乙酸乙酯萃取物可影响舞毒蛾幼虫的解毒酶、保护酶及消化酶,扰乱其正常生理代谢。