Preliminary Studies on the Intergeneric Hybridization Between Brassica napus with OguCMS and Orychophragmus violaceus

In the cross between B. napus with OguCMS x Orychophragmus violaceus, pre-fertilizationcompatibility was observed. An intergeneric hybrid was successfully obtained by usingovary culture. The hybrid status was confirmed by cytology, morphology, fertility,isozyme and miosis analysis. The seed setting rate was 0.0072%. An amphidiploid of thehybrid was also produced by the use of chromosome-doubling method with 0.1% colchicinestreatment. Obtaining this hybrid and its amphidiploid has important theoretical andutilization value.     

油菜萝卜质不育系测交后代恢复材料F_2(TC_1)的选育及细胞遗传学研究

 以 Ad- 6 (F5 )与甘蓝型油菜 Ogu CMS测交后代可育株 F2 (TC1 )为材料 ,研究了测交后代的形态特征及体细胞染色体数目和花粉母细胞的减数分裂行为。结果表明 ,F2 (TC1 )的特征类似于 Ad- 6 (F5 ) ,体细胞染色体数为 2 n=35～ 40。花粉母细胞减数分裂过程能够完成 ,但出现许多异常现象。在 PM CMI期出现有较高单价体及多价现象 ,并且还有染色体桥存在。中期及后期有落后染色体存在 ,后期 还出现有多极分裂现象。在四分体时期 ,除四分体外 ,还有二分体、三分体、五分体、六分体存在 ,其中三分体所占比例较高。这些现象说明 ,F2 (TC1 )还很不稳定 ,这可能是由于外源遗传物质与油菜的遗传背景不协调造成的。     

利用花序轴组培快繁青花菜萝卜胞质雄性不育系的研究*

 以萝卜胞质不育型青花菜的幼嫩花序轴为外植体进行组织培养,可成功诱导出苗。将幼嫩花序轴接种到不同激素配比的诱导培养基上,均有愈伤组织产生,其中在MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L培养基培养效果最好,诱导率高达100%;用MS + NAA 0.01mg/L +KT 0.2mg/L + 6-BA 0.5mg/L分化不定芽时,不定芽分化效果最好,芽分化率可达6.16;用1/2 MS + NAA 0.2mg/L进行生根培养,生根率高达86.7%,平均根数13.5条,在一定的温度和湿度条件下培养,移栽成活率可达85%以上。     

甘蓝OguCMS相关的花药优势表达转录因子BoBHLH1的克隆与表达分析

以甘蓝OguCMS花药中下调表达的EST序列为信息探针,克隆到一个与甘蓝OguCMS相关的bHLH家族转录因子,命名为BoBHLH1（GenBank登录号：GU390530）,该基因编码102个氨基酸,具有典型的bHLH结构域,可识别顺式元件G-box序列,预测该蛋白定位在线粒体上。荧光定量RT-PCR表明,BoBHLH1是一个甘蓝花药中优势表达的基因,且在花药发育的早期和晚期均有一个表达高峰。研究结果为下一步分析其在甘蓝花药发育过程中的功能验证及OguCMS核质互作机理奠定了基础。     

甘蓝Ogura 细胞质雄性不育相关基因BoMF1启动子的克隆及功能分析

 通过TAIL-PCR 染色体步移技术,从甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L.）基因组中克 隆到胞质雄性不育（OguCMS）相关基因BoMF1 翻译起始位点上游521 bp 的启动子序列。软件分析预测 表明,该启动子序列中存在多个顺式作用元件,包括TATA-box、CAAT-box、MYB 结合位点、植物激 素响应单元等。为了研究该启动子的表达特性,亚克隆了BoMF1 转录起始位点上游521 bp 序列,将其置 换pBI121 中的CaMV35S 启动子,驱动其下游的GUS 基因,构建植物表达载体pBI121-BoMF1P,以pBI121 空载体作为阳性对照,通过农杆菌（LBA4404）介导法转入拟南芥。结果表明,甘蓝BoMF1 启动子序列 能驱动GUS 基因在拟南芥花药发育晚期的花药和花粉中特异表达,表达具有组织特异性。     

低温胁迫对3个小白菜OguCMS与保持系生化指标的影响

以3个小白菜OguCMS与保持系为试材,苗期进行低温处理,对其叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化进行研究。结果表明:不育系的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量在处理的各阶段均低于其保持系,SOD、POD和CAT活性则是不育系高于其保持系。随着低温处理时间的延长,不育系和保持系叶绿素和可溶性蛋白质含量一直下降,可溶性糖和脯氨酸含量呈现先上升后下降的趋势;SOD、POD和CAT活性呈现先上升后下降的趋势。不育系和保持系在处理的各个阶段变化的一致性和处理后各生化指标数值差异缩小,表明小白菜OguCMS在苗期遇低温的抗逆能力与保持系很接近。     

甘蓝型油菜萝卜质不育系的诱变效应

用~(66)C_9—γ射线处理扩_(077)、H_(23)、2432为保持系的萝卜质不育系。2432保持的萝卜质不育系半致死剂量约为100k rad,H_(23)、扩_(077)保持的萝卜质不育系半致死剂量约为80k rad。120k rad处理扩_(077)保持的萝卜质不育系M_1,出现了苗期不缺绿的不育株和可育株;120k rad处理H_(22)保持的萝卜质不育系叫,出现了缺绿可育株。100k rad处理扩_(007)保持的萝卜质不育系M_2,出现了19株苗期不缺绿、花器形态与萝卜质不育系一样的不育株。并对这些M_1、M_2的结果进行了讨论。     

白菜型油菜萝卜细胞质不育系向甘蓝型油菜转移过程中缺绿症和不育性的恢复

1991～1995年用白菜型油菜萝卜细胞质不育系（低温叶片缺绿）与不同的甘蓝型油菜测交、回交，3a观察了52个组合，其中有30．7％组合出现低温下不缺绿的正常甘蓝型绿色植株（NGP），但组合间NGP发生频率变异较大，从1．4％～100％不等，这种差异可能与核背景有关。绝大多数NGP同时伴随着蜜腺、育性恢复正常，少数NGP为半不育类型，但蜜腺恢复正常。可育的NGP自交后代表现复杂，大致可分为3种类型，绝大多数为NGPⅡ类型。     

不结球白菜OguCMS下胚轴原生质体培养再生植株

取不结球白菜OguCMS 5d苗龄的下胚轴 ,在 2 0mg/mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,10mg/mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及CaCl2 ·2H2 O 10mmol/L、KH2 PO4 0 .7mmol/L、甘露醇 0 .5mol/L的酶液中游离 36h ,50 0r/min下离心收集下胚轴原生质体。原生质体在KM8P1附加 2 ,4 D 0 .5mg/L、 6 BA 0 .2 5mg/L、NAA 1.0mg/L的培养基上培养 2 1d形成小愈伤组织 ,经MS附加 2 ,4 D 1.0mg/L增殖愈伤组织 ,在MS附加 6 BA 10 .0mg/L和NAA 0 .3mg/L培养基上进行芽分化培养 ,并在无任何激素的MS培养基上生根 ,14d后即可获得完整的再生植株。