同源四倍体及其原二倍体黑皮冬瓜光合光响应模型筛选

为了筛选出最适合黑皮冬瓜Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.的光合光响应模型,为其育种提供理论依据,以同源四倍体及其原二倍体黑皮冬瓜为试验材料,对8种经典的光合光响应模型适用性进行了比较分析。结果表明：二次多项式能够表现出光抑制情况,但在拟合过程中出现暗呼吸速率为正值、光补偿点为负值及无法解释当光强达到饱和后光合速率快速下降的问题;直角双曲线、非直角双曲线及指数函数Ⅰ、指数函数Ⅱ无法直接求取光饱和点、光补偿点,结合常用的光饱和点的计算方法得到的光饱和点与实测值均存在较大的偏差,且指数函数Ⅱ在计算光饱和点时表现出明显的人为性,也无法拟合光抑制情况,但4种模型拟合得到的光补偿点均与实测值相差不大;指数修正模型因系数β为负值,无法求取四倍体黑皮冬瓜材料的光饱和点和最大净光合速率,且拟合得到的四倍体黑皮冬瓜的光补偿点明显低于实测值;直角双曲线修正模型计算得到的暗呼吸速率及二倍体黑皮冬瓜的光饱和点明显低于实测值,但获得的四倍体及其二倍体的最大净光合速率与实测值最接近,说明其在拟合最大净光合速率上有优势;整体上分段函数计算得到的黑皮冬瓜的各光合参数与实测值最为接近,与实测值的平均相对误差最小,也能很好的拟合发生光抑制部分的光响应曲线。分段函数拟合同源四倍体及其原二倍体黑皮冬瓜光合光响应曲线效果较其他模型效果好,分段函数模型为黑皮冬瓜最适合的光合光响应模型。     

Callus induction and plant regeneration from cotyledonary explants of ash gourd (Benincasa hispida L.)

A protocol for the production of complete plantlets through multiple shoots from the cotyledon-derived calli of ash gourd (Benincasa hispida L.) is described. The embryos were excised from mature seeds and cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 6-benzylaminopurin (BAP, 1–5 μM). After 10 days the well-developed green cotyledons from the growing embryos were isolated and cultured on MS medium fortified with 2,4-D (1–6 μM). The cultured cotyledons gave rise to luxuriantly growing calli after 6 weeks. These calli were subcultured on MS medium supplemented with various concentrations of BAP (1–6 μM) alone or in combination with naphthalene acetic acid (NAA, 0.2 and 0.5 μM) for regeneration. The regenerated shoots were multiplied and rooted on quarter strength MS medium supplemented with indole-3-butyric acid or NAA (1–5 μM). The rooted shoots were transplanted to soil with 90% success.     

冬瓜杂种种子纯度鉴定的SSR分析

种子纯度是种子质量的核心指标,目前冬瓜、节瓜杂种优势已被广泛地应用于生产。探索出一种快速、准确的冬瓜、节瓜品种纯度鉴定方法是确保种子质量的技术保证,也是品种纯度检测实现商业化的前提。本研究以‘绿优’冬瓜和‘梅花8号’节瓜及其各自亲本为试验材料,利用SSR分子标记技术对亲本及杂种之间的多态性进行分析。结果显示,从200对SSR引物中筛选出2对多态性引物scaffold4775和scaffold5674,用于‘绿优’冬瓜和‘梅花8号’节瓜杂种种子纯度的鉴定。其扩增片段电泳条带清晰可辨,杂交种中呈现双亲的互补带型,SSR标记表现出稳定的显性和共显性,能将‘绿优’冬瓜和‘梅花8号’节瓜与其父母本区分开来。分子检测平均纯度均为98%,田间纯度鉴定分别为98%和99%,结果基本一致,表明引物scaffold4775和scaffold5674可用于‘绿优’冬瓜和‘梅花8号’节瓜的纯度鉴定。SSR分子标记呈现出经济快速、准确等特点,在冬瓜、节瓜品种纯度鉴定上其应用前景十分广泛。     

花生根结线虫对节瓜苗期植株生长及主要生理特性的影响

对感染花生根结线虫的节瓜植株主要生理指标和生长量的变化进行测定。结果表明：花生根结线虫的侵染明显降低节瓜根系的活力,引起节瓜苗期植株的Ｎ,Ｐ,Ｋ和Ｍｇ含量显著下降,但对Ｃａ所吸收则有所增加;植株的叶绿素含量和光合速率均显著降低,但呼吸强度在线虫接种量为３０００和５０００条时则明显提高;植株生长的各项指标也发生不同程度的变化。     

水分胁迫对刚毛柽柳可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量变化的影响

本研究在土壤相对含水量分别为90％，70％，50％，30％，10％时，探讨了刚毛柽柳（Tamarix hispida）同化枝中可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量的变化规律，并分析了三者之间的关系。结果表明，在土壤相对含水量逐渐减少时，刚毛柽柳同化枝中可溶性糖、脯氨酸含量持续升高，但前者的增幅明显小于后者。可溶性蛋白的变化规律则有所不同，土壤相对含水量从90％减小到70％时，可溶性蛋白含量开始小幅增加；随着水分胁迫加深，可溶性蛋白急剧增加，在土壤相对含水量为30％时达到最大；而当土壤相对含水量下降到10％时，可溶性蛋白开始分解，含量迅速下降。蛋白质的双向电泳图谱表明，当土壤相对含水量从70％减小到50％时，刚毛柽柳中出现了至少4个新的蛋白点。水分胁迫下可溶性糖和脯氨酸的积累为刚毛柽柳体内与抗旱有关的新蛋白的表达提供了物质基础，增强了刚毛柽柳的抗旱性。     

刚毛柽柳 FeSOD 基因的克隆及耐盐应答分析磁

植物响应盐胁迫逆境,涉及一系列的保护酶类基因的表达和调控, SOD酶是其中重要的一类。本研究通过对盐胁迫后7个柽柳转录组分析和进一步测序验证,获得了2个柽柳FeSOD基因全长cDNA序列,它们编码蛋白的氨基酸残基数分别为256、308,分子量为63.8、75.4 kDa,理论等电点为5.0和5.1。实时荧光定量PCR结果显示这2个FeSOD基因在盐胁迫后柽柳根和叶中呈现不同的表达模式。在根中,第9天时, ThFeSOD1和ThFeSOD2基因的表达均明显上调。在叶中, ThFeSOD1和ThFeSOD2在胁迫3天受明显的诱导,而5天表达受明显的抑制。     

云南油瓜开发研究初探

油瓜是一种很具开发潜力的热带油料植物，自植物学家蔡希陶先生1933年在云南发现以来，就开始了油瓜的驯化栽培研究，2008年云南农业大学香料研究所进行包括油瓜在内的油料作物立体栽培模式研究，对油瓜驯化栽培和开发有新的认识和见解。     

冬瓜SSR-PCR体系优化及引物筛选

本研究利用L16(54)正交试验设计研究了影响冬瓜SSR-PCR的五个因子(10×Buffer(含Mg2+),d NTP,DNA,引物,r Taq),研究结果表明Buffer(含Mg2+)和r Taq对PCR影响最明显,最终筛选出最佳反应体系:10×Buffer 2.0μL(1×Buffer),d NTP 2.0μL(200μmol/μL),DNA 0.6μL(6 ng/μL),引物0.4μL(0.2μmol/L)。体系体积为20μL,循环数为35。引物筛选程序为:94℃预变性3 min,94℃变性45 s,58℃~68℃复性30 s,5个循环,每个循环退火温度降2℃,72℃延伸1 min,94℃变性30 s,50℃~58℃复性1 min,8个循环,每个循环退火温度降低1℃,72℃延伸1 min,94℃变性30 s,50℃复性30 s,72℃延伸1 min,共30个循环,72℃延伸7 min。本研究建立了适合冬瓜的SSR反应体系和引物多态性筛选程序。     

Light and scanning electron microscopy studies on the infection process of melon leaves by Colletotrichum lagenarium

Colletotrichum lagenarium is the casual agent of anthracnose disease of melons. Light and scanning electron microscopy were used to observe the infection process of C. lagenarium on the leaves of two melon cultivars differing in susceptibility. On both cultivars conidia began germinating 12 h after inoculation (hai), forming appressoria directly or at the tips of germ-tubes. By 48 hai appressoria had melanised and direct penetration of host tissue had begun. On the susceptible cultivar, infection vesicles formed within 72 hai and developed thick, knotted primary hyphae within epidermal cells. By 96 hai C. lagenarium produced highly branched secondary hyphae that invaded underlying mesophyll cells. After 96 hai, light brown lesions appeared on the leaves, coincident with cell necrosis and invasion by secondary hyphae. While appressoria formed more quickly on the resistant cultivar, fewer germinated to develop biotrophic primary or invasive necrotrophic secondary hyphae than on the susceptible cultivar. These results confirm that C. lagenarium is a hemibiotrophic pathogen, and that resistance in melons restricts colonisation by inhibiting the development of necrotrophic secondary hyphae.     

柽柳过氧化物酶基因的序列分析及山新杨遗传转化研究

对刚毛柽柳(Tamarix hispida)的过氧化物酶基因(ThPOD)全长序列进行分析,结果表明,该基因全长为1 376 bp,包含一个1 086 bp的开放阅读框,可编码361个氨基酸残基,蛋白分子质量为39.3 ku。根据ThPOD基因保守序列设计特异引物克隆该基因,并成功构建了pROKⅡ-ThPOD植物过表达载体,利用农杆菌介导法转化山新杨(Populus davidiana×P.bolleana),经PCR和Northern blot鉴定,初步证明外源基因ThPOD已整合到山新杨的基因组中并在转录水平上进行了表达。