利用shRNA真核表达载体干涉雌性鸡胚性腺中芳香化酶基因(CYP19A1)的表达

本研究通过把构建的短发夹结构RNA(shRNA)真核表达载体导入鸡胚,检测鸡胚性腺分化期质粒载体在鸡胚体内代谢情况及雌性鸡胚性腺中芳香化酶基因(CYP19A1)mRNA表达效率,进而探讨利用该方法在鸡胚体内进行特定基因干涉的可行性.实验针对CYP19A1基因构建了4条特异性表达载体,一条非特异性表达载体.每个实验组选取45个新鲜种蛋作为实验材料进行胚盘下腔注射,并设立空白对照组.鸡胚发育12d时,检测各处理组鸡胚肝脏组织中质粒存在情况,并取其左侧性腺组织进行目标基因的荧光定量分析.研究结果表明,导入组在12日胚龄时所有鸡胚基因组中均可检测到绿色荧光蛋白基因(EGFP);荧光定量结果显示,导入特异性表达载体cyp-580、cyp-1083和cyp-1295后,对应雌性鸡胚性腺CYP19A1 mRNA表达效率显著低于空白对照组,干涉效率分别为:73％、52％和85％;特异性表达载体cyp-1403组CYP19A1mRNA表达效率与空白对照组相比有所降低但无显著性差异.本实验为诱导鸡胚性反转提供了新方法并建立了鸡胚发育期特定基因体内干涉新平台.     

番鸭性别控制的研究

本试验在福建农业大学种番鸭场进行．用了３种处理方法;（１）以外源激素分别用浸泡、涂种和喷雾的方法处理番鸭受精蛋;（２）用精氨酸溶液（５．０、２．５ｍｇＬ－１）,睾丸组织匀浆及芳香化酶抑制剂（５．０、２．５ｍｇＬ－１）作为性控液分别灌注母鸭产道和稀释公鸭精液;（３）用芳香化酶抑制剂（５．０、２．５ｍｇＬ－１）涂抹种蛋．结果表明：性激素处理法可使胚胎性别分化发生倾向性改变,其中已烯雌酚处理组明显提高雌性比例（Ｐ＜０．０５）,３种处理方法的雌性百分比分别为：（７５．８±３．５）％、（７９．３±３．５）％和（７５．５±１．８）％;其他几种激素处理效果不明显（Ｐ＞０．０５）．用性控液灌注母鸭产道和稀释精液,其中精氨酸组雄性百分比略有提高,分别为（５８．２±１．５）％和（５９．２±１．１）％;而睾丸组织匀浆组却使雌雏增多,雌性百分比分别为（５６．７±２．１）％和（５６．３±３．８）％,但二者与对照组均无明显差异（Ｐ＞０．０５）;芳香化酶抑制剂处理组极显著提高雄性比例（Ｐ＜０．０１）,各处理组雄性百分比分别为（７５．４±７．４）％和（８４．４±１．５）％,比对照组（４９．７±３．５）％分别提高２５．７％和３４．７％,也明?     

奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆、序列分析和结构预测

采用RT-PCR和RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法分离出奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶(P450aromA)的全序列,得到1784 bp的全长cDNA,包括38 bp 5'非翻译区,1566 bp阅读框以及含Poly(A)信号(AATAAA)的167 bp 3'非翻译区[不包括Poly(A)].阅读框共编码521个氨基酸,计算的蛋白质分子量为59 ku.同源性分析显示,奥利亚罗非鱼P450aromA的氨基酸序列与其它鱼性腺P450arom具有70%以上的同源性,与其它鱼脑P450arom为60%左右同源,但芳香化酶高保守区包括I-螺旋区,芳香化酶特异保守区II和血红素结合区III和其它鱼芳香化酶的同源性分别高达83%～96%, 78%～86% 和 85～100%.系统发育分析表明奥利亚罗非鱼P450aromA与鱼类性腺P450arom属于同一分支的.生物信息学分析显示:奥利亚罗非鱼P450A基因编码的蛋白无信号肽,无跨膜区域,为非分泌蛋白,同时含有多个酪蛋白激酶II磷酸化位点, N-糖激化位点,N-肉豆蔻酰化位点,蛋白激酶C磷酸化位点.     

芳香化酶与黄鳝的性逆转

黄鳝是一种具有天然单向性逆转特性的动物.雌性成熟发育的第一个周期内黄鳝个体全部表现为雌性,性成熟产卵后,卵巢内卵细胞败育,卵巢结构逐渐退化,与此同时雄性细胞开始发育,通过雌雄间性发育过渡到雄性发育.芳香化酶是细胞色素P450家族中的一员,催化某些雄激素转化为雌激素,是雌激素生物合成中的关键酶和限速酶,广泛存在于大多数脊椎动物的脑和垂体中.芳香化酶调节神经内分泌和繁殖功能以及性行为,并参与非哺乳动物性腺分化的调控.芳香化酶与黄鳝的性逆转可能存在着潜在的联系并参与黄鳝的性逆转.     

大豆黄酮对伊莎鸡卵泡发育及其P450arom基因表达的影响

实验探讨了大豆黄酮(DAI)对伊莎鸡卵泡发育及其芳香化酶(P450arom)mRNA表达的影响。实验选取16只产蛋后期伊莎鸡,等分为对照组和DAI处理组。对照组饲喂基础日粮,实验组在基础日粮中添加10 mg/kgDAI。实验持续7周后,分离排卵前卵泡(F1、F2、F3……)的颗粒层及小黄卵泡和大白卵泡,通过RT-PCR法检测P450arom mRNA表达的相对丰度。结果表明:DAI明显提高了伊莎鸡小黄卵泡和大白卵泡的数量,P450arommRNA在伊莎鸡不同发育阶段卵泡中的表达存在差异,部分卵泡P450arom mRNA表达的相对丰度显著增加。因此,在产蛋后期伊莎鸡基础日粮中添加DAI可增加不同发育阶段卵泡的数目,上调部分卵泡中与发育相关的基因表达以促进卵泡发育。     

17β－雌二醇诱导鲻鱼雌性化的机制：芳香化酶和雌激素受体双染定位研究

用免疫细胞化学双重染色技术和鼠抗人芳香化酶抗体、兔抗人雌激素α受体与β受体亚型(ER-α和ER-β)抗体、兔抗人雌激素(E2)抗体，对鲻鱼(Mugil cephalus)脑各部位进行定位研究。结果显示，芳香化酶和E2、芳香化酶和ER-α、芳香化酶和ER-β、ER-α和E2的双染免疫活性物质分布在鲻鱼嗅脑、大脑、间脑和小脑的神经细胞的胞核或胞质及其突起或神经纤维上。值得指出的是，鲻鱼下丘脑视前区芳香化酶免疫活性细胞上共存有雌激素α受体与β受体亚型，提示E2诱发鲻鱼雌性化的作用机制是，E2先与芳香化酶样神经细胞上的雌激素受体结合，而后激发与性分化相关的芳香化酶基因的表达。     

夏季养生四原则

一是健脾除湿。湿邪是夏天的一大邪气，加上夏日脾胃功能低下，人们经常感觉胃口不好，容易腹泻，出现舌苔白腻等症状，所以应常服健脾利湿之物，一般多选择健脾芳香化湿及淡渗利湿之品，如藿香，莲子，佩兰等。     

大豆异黄酮植物雌激素调节大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的机理

通过检测cAMP的浓度、cAMP依赖性的蛋白激酶A(PKA)活性、睾酮的含量及芳香化酶活性的变化，体外研究了大豆异黄酮调节大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的机制。结果显示：大豆异黄酮能够提高cAMP的含量和PKA的活性，同时抑制了芳香化酶的活性，最终导致间质细胞分泌睾酮增加。提示大豆异黄酮植物雌激素促进睾酮的分泌主要是通过激活间质细胞cAMP／PKA信号通路，并且抑制芳香化酶活性，从而降低睾酮向雌二醇的转化而实现的。     

浅谈紫苏在宠物临床的应用

紫苏包括两部分一部分为叶，一部分为梗，气香，味道淡，干嚼如柴，药性温，紫苏可谓是芳香化浊的代表药物之一。苏叶常用于外感寒湿的病例，可宣散在表之寒湿。苏梗宽中行气而和胃，胃和则能止呕，有些犬在怀孕期间出现妊娠性呕吐现象可以使用苏梗行气宽中止呕。紫苏归经为肺，胃，膀胱经，紫苏煎煮无苦味略带芳香，其I生又温，因此具有宣化胃中寒湿的作用，但力量轻，若寒湿成饮而停留于胃，     

芳香化酶(P450arom)mRNA在黄鳝脑组织中的表达

为了揭示芳香化酶与黄鳝性逆转之间的内在联系和作用机制,本研究以不同性别黄鳝的脑组织为试验材料,采用实时定量PCR方法揭示P450arom mRNA在不同性别黄鳝的脑组织上的表达规律。实时定量PCR结果表明P450arom mRNA在雌性、雌雄间性、雄性黄鳝的脑组织中均有表达,其表达水平不断下降。总之,黄鳝脑组织中的芳香化酶可能参与黄鳝的性逆转过程,且与其性别转化密切相关,推测黄鳝脑组织中的芳香化酶的表达水平高低对黄鳝的性逆转可能起着决定性的作用。