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2.
以原头节可溶性粗抗原经Sephadex G-200层析纯化抗原为包被抗原,兔抗羊IgG-HRP结合物为显色剂,建立检测羊脑多头蚴病血清抗体的Dot-ELISA,并以ELISA作平行对照。结果,粗抗原和层析纯化抗原检测86头份羊脑多头蚴病阳性血清,其敏感性分别为94.18%和93.02%,两种抗原的敏感性无显著差异;检测122头份绦虫蚴病阴性血清,18头份棘球蚴病阳性血清,35头份细颈囊尾蚴病阳性血清,其特异性分别为90.29%和95.43%。两种抗原的特异性差异显著。Dot-ELISA和ELISA两种方法的符合率为100%。层析纯化抗原比粗抗原的特异性有了明显提高,而敏感性没有降低。层析纯化抗原和操作术式都具有良好的重复性,Dot-ELISA和ELISA对比试验结果相近,且具简便、快速及不需要复杂设备等优点,是一种检测羊脑多头蚴病血清抗体的理想方法。 相似文献
3.
4.
5.
从甜瓜子叶中提取总DNA 总被引:4,自引:1,他引:4
用分子标记方法检测甜瓜杂交种子纯度,如果从真叶中提取DNA,检测周期至少需要15d。为了缩短检测周期,我们分别以甜瓜的成熟干种子、吸胀水后“露白”种子、3d龄刚转绿子叶、6d龄子叶、9d龄子叶和12d龄子叶为材料,进行了提取总DNA的研究。结果表明:除了干种子和吸胀水后“露白”种子外,其他的材料都可以提取到DNA,但是DNA的质量因子叶日龄不同而存在很大的差异。不同日龄的子叶中,以3d龄子叶提取的DNA质量好。子叶6d龄时,提取的DNA质量次于3d龄,少量DNA开始出现降解,以后随着子叶日龄的增加,DNA降解加重。另外,与以真叶为材料提取的DNA样品相比较,子叶DNA样品中的蛋白质等杂质含量高,应增加氯仿抽提纯化次数。 相似文献
6.
对猪瘟病毒(CSFV)C株、LT株E2基因主要抗原区在pGEX系列表达载体中原核表达的融合蛋白进行了变性、复性和纯化回收试验。用建立的变性、复性和纯化方法,获得了可溶性的纯化蛋白E2,其纯度达70%,回收率为10%。对复性纯化的E2蛋白进行了免疫活性检测,结果表明,其比未纯化蛋白的免疫活性高20倍左右。 相似文献
7.
人工蛹虫草子实体及大米培养基残基中虫草素的提取纯化方法 总被引:9,自引:0,他引:9
本实验主要对人工蛹虫草子实体及培养基中虫草素(3‘-脱氧腺嘌呤核苷)进行提取、纯化及纯度鉴定。结果表明:经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80-85℃水浴12小时、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶,可得到一定纯度的虫草素晶体。 相似文献
8.
9.
10.
为建立最佳的牛源停乳链球菌荚膜多糖提取和纯化方法,用停乳链球菌地方菌株,开展了细菌生长过程中菌液浓度与荚膜多糖得率、发酵液pH值对荚膜多糖得率、不同浓度乙醇沉淀核酸及多糖的效果、温度和时间对荚膜多糖得率、冷酚抽提次数对荚膜多糖得率和蛋白含量的影响等一系列实验,同时对制备的3批荚膜多糖进行了各项指标的检测。结果表明,牛源停乳链球菌在p H值为7.0的发酵培养液中培养8 h时荚膜多糖得率最高,最佳的去核酸乙醇浓度为25%,最佳沉淀多糖的乙醇浓度为80%,最佳温度和时间为4℃作用24 h。制备的3批荚膜多糖,其荚膜多糖回收率均在85%以上,蛋白质与核酸含量均低于1%,唾液酸含量在12.5%~14.3%间。说明建立的牛源停乳链球菌荚膜多糖提取纯化方法纯化荚膜多糖得率和纯度均比较高,符合疫苗生产要求。 相似文献