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1.
以原头节可溶性粗抗原经Sephadex G-200层析纯化抗原为包被抗原,兔抗羊IgG-HRP结合物为显色剂,建立检测羊脑多头蚴病血清抗体的Dot-ELISA,并以ELISA作平行对照。结果,粗抗原和层析纯化抗原检测86头份羊脑多头蚴病阳性血清,其敏感性分别为94.18%和93.02%,两种抗原的敏感性无显著差异;检测122头份绦虫蚴病阴性血清,18头份棘球蚴病阳性血清,35头份细颈囊尾蚴病阳性血清,其特异性分别为90.29%和95.43%。两种抗原的特异性差异显著。Dot-ELISA和ELISA两种方法的符合率为100%。层析纯化抗原比粗抗原的特异性有了明显提高,而敏感性没有降低。层析纯化抗原和操作术式都具有良好的重复性,Dot-ELISA和ELISA对比试验结果相近,且具简便、快速及不需要复杂设备等优点,是一种检测羊脑多头蚴病血清抗体的理想方法。 相似文献
2.
《中国兽医杂志》2016,(9)
为建立一种简单、快速、敏感、特异的猪伪狂犬病病毒野毒抗体血清学检测方法,本研究利用胶体金标记SPA蛋白作为金标垫,以重组g E蛋白和猪Ig G分别作为检测线和质控线,组装检测猪伪狂犬病病毒g E抗体的胶体金免疫层析试纸条。该试纸条肉眼于15 min内即可判定结果,检测PCV-2、PRRSV、PEDV、CSFV、PPV、PRV疫苗毒的阳性血清均为阴性,检测PRV野毒阳性血清的灵敏度达1∶1 280,与IDEXX g E-ELISA抗体检测试剂盒的符合率为95.31%,室温条件下可稳定保存6个月以上。本研究研制的PRV野毒抗体胶体金免疫层析试纸条操作简单、检测快速、敏感性高、特异性强,可用于PRV野毒感染的快速诊断,特别适合于现场检测。 相似文献
3.
为建立一种快速诊断鸭坦布苏病毒(DTMUV)的方法,以2株(B9D7B8G10和B9D10C7株)抗DTMUV的单克隆抗体制备DTMUV胶体金免疫层析试纸条。采用经典的柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液,利用rProtein G琼脂糖凝胶亲和层析法对两株单克隆抗体腹水进行纯化并鉴定;以纯化的B9D7B8G10株单克隆抗体作为标记抗体,通过调节单克隆抗体浓度与pH确定胶体金探针最佳结合条件;同时,在硝酸纤维素膜(NC膜)检测带包被纯化的B9D10C7株单克隆抗体,质控带包被山羊抗小鼠IgG抗体,建立检测DTMUV胶体金免疫层析试纸条;成功建立试纸条后,对试纸条敏感性、特异性、重复性和稳定性进行检测,并与RT-PCR检测方法进行比较,对200份临床疑似感染样品进行检测。结果显示:制备的胶体金试纸条在15 min内即可完成检测,最低检测稀释度为1:50,且不与鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅星状病毒、禽白血病病毒发生交叉反应;应用试纸条和RT-PCR方法分别对200份临床疑似样品进行检测,两者符合率达98%。结果表明,制备的胶体金试纸条敏感性高、特异性强、稳定性好、重复性好,为DTMUV的快速检测提供了... 相似文献
4.
采用超声辅助提取法提取复方免疫增强剂中的多糖,以Sevag法除蛋白后分级醇沉得粗多糖PS1、PS2和PS3。粗多糖PS1、PS2和PS3上离子交换柱层析分离纯化,以0-2.0MnaC l溶液进行梯度洗脱得PS1A、PS2A和PS3A多糖组分,再经过Sephadex G-200凝胶柱层析分离得到三个主要多糖组分PS1A-Ⅰ、PS2A-Ⅱ和PS3A-Ⅲ。利用凝胶层析、纸层析及紫外分光光度法进行纯度鉴定,结果表明PS1A-Ⅰ、PS2A-Ⅱ和PS3A-Ⅲ为均一多糖。 相似文献
5.
6.
7.
为构建景天科多肉植物品种评价体系,筛选适宜宿迁地区引种栽培的多肉植物品种,从观赏质量、生态质量、繁殖养护难度、市场潜力4个方面构建景天科多肉植物品种评价体系,以株形、叶形、叶色、呈彩期、抗热性、抗寒性、抗病虫性、存活度、繁殖难度、养护难度、频度、销量、价格和价格浮动为指标,运用层次分析法对32种景天科多肉植物品种进行评价分析。结果表明:在14个评价指标中销量、抗热性、价格浮动、存活度、呈彩期权重值排在前5位,对景天科多肉植物品种综合质量影响较大;根据综合指数的大小将32个品种分为3个等级,评价等级为Ⅰ级的种类有8种,该类植物适合在宿迁地区引种应用;评价等级为Ⅱ级的种类有21种,引种应用时根据实际需要选用;评价等级为Ⅲ级的共有3种,不适合在宿迁地区引种栽培。运用层次分析法可有效地对景天科多肉品种综合评价分级,评价结果与实际栽培应用表现基本一致。 相似文献
8.
利用盐析、G-75凝胶过滤层析和DEAE-葡聚糖纤维素离子交换层析技术,从牛心中分离出心肌型脂肪酸结合蛋白,经SDS-PAGE鉴定与免疫印迹(Western blot)分析,获得了纯品H-FABP。采用噬菌体随机展示七肽库,以H-FABP为靶标,对其亲和配体进行筛选,结果获得了与H-FABP有特异性亲和作用的配体序列,为其临床检测急性心肌梗塞新方法的建立奠定了基础。 相似文献
9.
猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究 总被引:3,自引:1,他引:3
采用柠檬酸钡作吸附剂,EDTA溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原,建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Sepharose 4B为载体。采用1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺进行肝素的固定化,将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明,通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了8.2倍,获得了比活超过1100U/mg的凝血酶,收率为60%。 相似文献
10.
以灭活鳗弧菌(SMW5)全菌为抗原,应用杂交瘤技术,制备了鳗弧菌单克隆抗体3株,分别命名为1H9、1C12、6F8,细胞亚类分别为IgG2a、IgM、IgG2b,其中1H9腹水效价为1∶6.4×105。制备鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体,效价为1∶3.2×105。应用纳米胶体金颗粒标记单克隆抗体1H9并制备金标垫,抗鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体与羊抗鼠抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜,分别作为检测线T和质控线C,建立鳗弧菌的胶体金免疫层析快速检测方法。经过对试纸条的特异性和灵敏度测定,结果表明:试纸条与嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌、创伤弧菌、副溶血弧菌、副溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌,7种水产常见病原菌没有交叉反应,与鳗弧菌特异性反应,检测灵敏度为6.3×104cfu·mL~(-1),检测所需时间低于10min。所制备的鳗弧菌胶体金免疫层析检测试纸条具有快速、简便、特异性高和适应基层生产推广应用等优点。 相似文献