全文获取类型
收费全文 | 2861篇 |
免费 | 83篇 |
国内免费 | 161篇 |
专业分类
林业 | 188篇 |
农学 | 177篇 |
基础科学 | 53篇 |
408篇 | |
综合类 | 1213篇 |
农作物 | 147篇 |
水产渔业 | 56篇 |
畜牧兽医 | 706篇 |
园艺 | 112篇 |
植物保护 | 45篇 |
出版年
2024年 | 29篇 |
2023年 | 56篇 |
2022年 | 81篇 |
2021年 | 98篇 |
2020年 | 75篇 |
2019年 | 88篇 |
2018年 | 46篇 |
2017年 | 85篇 |
2016年 | 117篇 |
2015年 | 104篇 |
2014年 | 141篇 |
2013年 | 121篇 |
2012年 | 182篇 |
2011年 | 169篇 |
2010年 | 197篇 |
2009年 | 164篇 |
2008年 | 190篇 |
2007年 | 159篇 |
2006年 | 138篇 |
2005年 | 101篇 |
2004年 | 81篇 |
2003年 | 75篇 |
2002年 | 40篇 |
2001年 | 54篇 |
2000年 | 44篇 |
1999年 | 36篇 |
1998年 | 57篇 |
1997年 | 38篇 |
1996年 | 52篇 |
1995年 | 21篇 |
1994年 | 36篇 |
1993年 | 46篇 |
1992年 | 31篇 |
1991年 | 37篇 |
1990年 | 45篇 |
1989年 | 38篇 |
1988年 | 9篇 |
1987年 | 10篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1980年 | 2篇 |
1974年 | 4篇 |
1973年 | 2篇 |
排序方式: 共有3105条查询结果,搜索用时 78 毫秒
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA 总被引:1,自引:0,他引:1
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴,取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴,绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明,本方法操作简单,结果可靠,稳定性高,适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。 相似文献