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黑曲霉木聚糖酶基因xynB在大肠杆菌中的表达及重组木聚糖酶的特性 总被引:1,自引:0,他引:1
从黑曲霉(Aspergillus niger) mafic-005中克隆得到木聚糖酶基因xynB。序列分析表明,该基因全长745 bp,含有一个67 bp内含子,编码225个氨基酸,理论分子量为24 kD(GenBank登录号:DQ174549),与已知黑曲霉xynB基因的同源性均较高。将该基因定向插入大肠杆菌(Escherichia coli )表达载体pET-28a (+)上,并转化E. coli BL21 获得重组菌株。经过IPTG诱导,xynB基因获得特异性表达。经SDS-PAGE分析,重组蛋白分子量约为30 kD。该重组蛋白经镍NTA琼脂糖凝胶FF纯化后达到电泳纯。酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为40 ℃,最适pH值为5.0,在酸性和常温条件下具有良好的稳定性。 相似文献
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