猪源牛病毒性腹泻病毒套式PCR检测方法的建立

根据GenBank中BVDV-1、BVDV-2、CSFV及新出现瘟病毒的基因序列,设计2对特异引物,建立了能鉴别诊断BVDV与CSFV的Nested-PCR检测方法;确定其方法的特异性、敏感性、稳定性。建立的Nested-PCR能从BVDV标准毒株、猪源BVDV毒株中扩增198bp特异性片段,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒检测结果为阴性。结果表明,该方法具有较好特异性;其敏感性可检测到0.195fg RNA模板量;经重复性试验表明该方法具有良好稳定性。初步应用检测表明,猪BVDV阳性率较高,达36.0%;牛血清及其制品、猪瘟活疫苗BVDV污染严重。本试验建立的Nested-PCR具有敏感、特异和稳定等特点,可用于临床诊断和流行病学调查。     

禽流感病毒通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR 检测方法研究

将套式PCR与荧光RT-PCR技术相结合,叠加这两种技术在敏感性和特异性方面的优势,建立敏感性高于常规荧光RT-PCR的套式荧光RT-PCR检测方法。从GenBank下载禽流感病毒NP基因和HA基因序列,通过比对选取较为保守的片段,设计AIV通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR引物和TaqMan探针;利用体外转录技术制备阳性对照,构建目的片段重组质粒;经反应体系和反应条件的优化,建立套式荧光RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法可特异性地检测禽流感病毒及H5亚型AIV,在30份鱼类养殖水样中检测到19份阳性样品,具有较高的敏感性和良好的特异性;具有高通量、快速的特点,可对大批量样品同时进行检测,试验耗时仅需5 h,是自然环境样品中极微量禽流感病毒检测的好方法。     

噬菌体最新分类与命名

《病毒分类一国际病毒分类委员会第9次报告》介绍了病毒的最新分类与命名,与2005年发布的《病毒分类一国际病毒分类委员会第8次报告》相比,分类体系更趋完善,病毒种类与数量大幅增加。本文重点介绍细菌病毒一噬菌体的最新分类体系,力求对所涉及的重要噬菌体给出准确而简明的中文名称,期望对中国噬茵体研究与应用领域的科学工作者有所帮助。     

我国部分地区近年来新城疫病毒流行株分子生物学特征的研究

参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列,在F基因的3’端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增,其扩增长度为450bp．测序结果表明：近十几年来,我国流行的新城疫毒株主要为基因Ⅶ型,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112～117）强毒株的氨基酸序列特征,并从分子水平上进一步证明我国最近流行的NDV主要为基因Ⅶ型NDV强毒株．     

植物丛枝症病毒病毒病原研究概况

对引起植物丛枝病害病毒的分类地位、生物学特性、抗原特性、电镜观察和基因组成了综合论述。     

牛瘟PCR检测方法的建立

建立一个可以识别牛瘟病毒亚洲株的PCR方法。根据已发表的牛瘟病毒 7个毒株的F基因序列 ,设计合成了一对扩增跨幅为 43 6bp的引物 ,这对引物对日本之中村 系兔化牛瘟病毒感染的 Vero细胞毒和日本之中村 IV系兔化牛瘟病毒感染的兔血毒、组织毒进行 RT-PCR扩增 ,结果该方法对该牛瘟病毒 RNA的扩增取得了与预期大小一致的 RT-PCR产物 ,而对照样品的扩增全为阴性 ,说明具有很好的特异性 ;该方法最低可检测到 0 .1 6ng的牛瘟病毒RNA,具有很好的敏感性     

副流感病毒基因工程研究进展

副流感病毒是一类不分节段的单股负链RNA病毒,按基因型可分为1、2、3、4和5型,5个型之间有少量的交叉免疫,各型的生物学特性和结构类似。该病毒宿主谱广,可感染人、牛和犬等多种动物。副流感病毒具有许多优良的特性,可作为活病毒疫苗的候选载体,通过反向遗传操作系统可使其表达外源基因,研发新型疫苗。作者在综述副流感病毒病原学、基因组结构及主要蛋白质等生物学特征的基础上,着重介绍了副流感病毒作为病毒载体在基因工程方面的研究进展。     

戊二醛癸甲溴铵溶液对HP-PRRSV体外杀灭效果测定

针对高致病性蓝耳病病毒（PRRSV）,农业部动物疫病防控重点开放实验室用戊二醛癸甲溴铵溶液对其进行了体外杀灭效果试验,结果显示大于或等于0.01%浓度的戊二醛癸甲溴铵溶液可体外完全杀灭PRRSV。根据结果建议该消毒剂对PRRSV临床使用浓度为≥0.01%,即1∶10 000稀释,但同时也要根据具体情况具体分析,适当提高使用浓度。     

克氏原螯虾口服疫苗免疫对白斑综合征病毒人工感染的保护作用

利用家蚕一杆状病毒表达系统在蚕蛹体内表达的重组病毒囊膜蛋白rVp28制成的疫苗，口服免疫克氏原螯虾，观察了其对白斑综合征病毒人工感染的保护作用。对试验虾分别进行了2％rVp28、2％普通蚕蛹液（阳性对照）和普通饲料（阴性对照）等3个处理，持续口服免疫75d。免疫35d后口服攻毒，20d内rVp28组的累积死亡率为36．67％，与阴性对照相比差异显著（P〈0．05），危疫保护率（PRP）达59．26％；注射攻毒后20d内．rVp28组的PRP为49．99％。免疫后55d对存活虾再口服攻毒，20d内rVp28组的累积死亡率为36．84％，与阴性对照相比差异显著（P〈0．05）．PRP为63．16％；2次注射攻毒后．rVp28组的PRP为31．25％。结果表明，重组囊膜蛋白rVp28免疫后．对口服感染具有显著的保护作用，对注射感染有一定的保护作用．