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1.
Tayita Suttirojpattana Theesit Juanpanich Rangsun Parnpai Teraporn Vutyavanich 《Animal Science Journal》2021,92(1):e13585
Two-cell stage and blastocyst stage mouse embryos were equilibrated in a medium containing 7.5% ethylene glycol (EG) and 7.5% dimethyl sulfoxide (DMSO) for 8–15 min. Vitrification was performed in a medium containing 0.5 M sucrose and either 15% EG + 15% DMSO, 17.5% EG + 17.5% DMSO, or 20% EG + 20% DMSO for 30 s. They were then placed either on a hemi-straw (HS) or a hollow fiber vitrification (HFV) device and vitrified by cooled air inside a 0.5-ml straw. In two-cell embryos, a 100% survival rate was obtained from all groups except the 20% HS group (P > .05). All vitrified two-cell groups showed similar rates of blastocyst development to that of fresh control group (P > .05), except 17.5% and 20% HFV groups, which were significantly lower than the other groups (P < .05). In the blastocyst embryos, the HFV groups were divided into two subgroups (non-collapsed; HFV-NC and collapsed; HFV-C blastocyst). Re-expansion rate in 15% HFV-NC, 17.5% HFV-NC, and 15% HFV-C groups was reduced (P < .05), whereas the rest were similar to control. In conclusion, we established a simplified, reliable, and closed system for HFV vitrification applying hemi-straw, which does not require skilled practitioners. 相似文献
2.
3.
AIM: To evaluate the genotype , muscle histopathology and ultrastructure in dko mice. METHODS: Dystrophin/Utrophin-deficient double knockouts (dko) mice were obtained from university of Oxford, UK. Genotype of filial generation of heterozygote was evaluated by PCR-SSP. HE staining and fluorescent immunohistochemistry by SABC-Cy3 were used to detect striated muscle of dko mouse, and the muscle ultrastructure was observed by transmission electron microscope(TEM). RESULTS: In 112 filial generation mice, there were 28 mdx (25.0%), 26 dko (23.2%) and 58 heterozygote (51.8%), which coincided with the law of Mendelian inheritance. HE staining showed that the myocytes were not very uniform, there were phenomenon of round outline, centrally nucleated fibers, widening interspace, inflammatory cell infiltration and connective tissue proliferation in dko mice. There were no any immunofluorescent expression of dystrophin and utrophin in sarcolemma in dko mice. TEM showed sarcolemma breakage, separation and edema, and loose myofibril texture, inflammatory cell infiltration and connective tissue proliferation in dko mice. CONCLUSION: PCR-SSP is a very quick and accurate way for genotype evaluation of filial generation. The pathophysiology of dko mouse was very similar to Duchenne muscular dystrophy (DMD), and dko mouse is an ideal animal model for study of DMD clinical therapy. 相似文献
4.
免疫剂量和母源抗体对禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫效力的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
利用表达 H 5亚型禽流感病毒 (AIV)血凝素基因的重组鸡痘病毒 (r FPV- HA)以不同剂量免疫 1日龄 SPF鸡、有或无母源抗体 (FPV、AIV H5)的商品鸡 ,并于免疫后 2 1d利用同亚型 AIV通过肌肉注射进行致死性攻击 ,通过检测免疫后 HI抗体应答、比较攻毒后发病率和死亡率评价免疫剂量和母源抗体对 r FPV- HA免疫效力的影响。结果发现 ,免疫后 2 1d,15 %~ 2 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可检出 HI抗体 ,而含母源抗体商品鸡检测不到 HI抗体。利用H5亚型 AIV致死性攻击后 ,10 3~ 10 6 PFU的 r FPV- HA可保护 95 %~ 10 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡抵御强毒攻击 ,使之免于发病和死亡 ;而不同剂量 r FPV- HA接种的含母源抗体商品鸡有 80 %~ 90 %发病和死亡。结果表明 ,在较宽的免疫剂量范围内 ,r FPV- HA对 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可提供良好的保护 ,显示出一定的应用前景 ;母源抗体影响 r FPV- HA诱导的免疫应答 ,且提高免疫剂量亦不能克服其干扰作用 ,这提示在实际应用中需优化免疫程序 ,避免母源抗体干扰。 相似文献
5.
Antiserum to a partially purified neuraminidase fromPasteurella multocida, type A:3, was adsorbed with protease-digestedP. multocida type 3 lipopolysaccharide (LPS) to remove LPS immunoreactivity. The LPS-adsorbed antineuraminidase caused a 77% reduction in the neuraminidase activity of homologousP. multocida in anin vitro enzyme neutralization test. All 14 mice passively immunized with the adsorbed antineuraminidase were protected against challenge infection with homologousP. multocida in a mouse protection test. Ten out of 14 mice in one group that received antisera containing antibodies to both neuraminidase and LPS were protected. In contrast, only 1 out of 14 mice that were immunized with pre-immune serum survived the challenge. These results suggest that antiserum toP. multocida neuraminidase was, at least partly, responsible for the protection observed in this study. Neuraminidase may be one of the immunogenic protective proteins present in aqueous extracts ofPasteurella multocida. 相似文献
6.
分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
从传染性法氏囊病病毒(IBDV)单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系1D10、1G1中得到了3株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白(Ig)McAb的杂交瘤细胞系1B7、1D7、3G6。其抗体类和亚类均属IgG2b,腹水的ELISA效价≥1∶25600,琼扩效价为1∶8~1∶16。3株McAb能与鸡血清中的Ig出现沉淀反应,琼扩在24h以内出现清晰的沉淀线,而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡IgG、IgM经SDS-PAGE后,分别用纯化并经辣根过氧化物酶(HPR)标记的1B7、1D7、3G6单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明,3株单抗识别的均为IgG、IgM分子的轻链 相似文献
7.
用两株单克隆抗体混合后包被ELLISA微孔板,加牛冠状病毒抗原,加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒免血清,再加上辣根氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体,加底物质显色间接ELISA检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细胞培养的牛冠状病毒上清液,其敏感度高出血凝试验(HA)8倍,从武汉市附近3个奶牛场采集犊牛腹泻粪便105份,用单抗ELISA检测牛冠状病毒抗原,共检出阳性36份,并与血凝及血凝抑制试验, 相似文献
8.
切割取样对胚胎发育的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
体视显微镜下,采用徒手持金属刀片和自制的玻璃切割针分别对小鼠和牛胚胎进行切割取样,并对取样后的胚胎进行体外培养48h,其发育率分别为76.7%(46/60)和80%(16/20),两者差异不显著(P>0.05);奶牛新鲜胚胎切割取样后,胚胎移植妊娠率47.1%(8/17),比对照组妊娠率59.0%(23/39)差异显著(P<0.05)。冷冻-解冻胚胎切割取样后移植妊娠率42.9%(6/17)虽然也比对照组50%低,但是差异不显著(P>0.05)。 相似文献
9.
为了建立一种快速、简便、敏感、特异地检测动物病理材料中布氏杆菌的方法,选用四种标记抗体法,对5种共15个生物型的布氏杆菌,以及大量与流产有关或常常污染病理材料的对照细菌,分别进行了纯菌、感染实验动物及牦牛组织材料的染色检查,并与柯氏染色法及细菌分离培养法进行了比较。结果表明,四种方法对于各种材料中的布氏杆菌(粗糙型犬布氏菌除外)均呈阳性反应,而绝大多数对照菌均呈阴性反应。其中尤以SPA法染色背景更为清晰,非特异性反应更少。这些方法既简便、快速,检出率也较高。对于布氏杆菌病的诊断和疫情监测,是很有价值的。 相似文献
10.