神经生长因子及其受体TrKA在山羊脊髓发育中的表达特点

运用免疫组织化学超敏 SP法对山羊胎儿脊髓发育中神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)及其高亲和力受体 Tr KA的表达及其功能进行了系统的研究和探讨。结果显示 ,山羊胎儿脊髓灰质中存在 NGF及其受体 Tr KA,于 6周龄胚就可检测到 ,随胚龄增加 ,其表达范围及免疫反应着色程度逐渐增强。 NGF主要分布于腹角和背角的神经细胞 ,反应产物主要定位于胞质和突起 ;Tr KA的分布主要以腹角及胶状质为主 ,反应产物主要定位于胞核 ,后期胞质及突起也可见到阳性反应。在山羊胎儿脊髓白质中也可观察到 NGF及 Tr KA免疫阳性反应 ,其发育后期更为显著 ,阳性反应主要分布于神经胶质细胞核、神经纤维的轴索及雪旺氏细胞。结果提示 ,NGF不仅对交感和感觉神经元的发育起作用 ,而且还与腹角运动神经元的发育有关     

NO对胎盘功能和胎儿生长发育的影响

一氧化氮(NO)化学结构简单,性质活跃,广泛参与机体的生理、病理调节。在妊娠期,NO可降低血管对加压物质的反应性,降低外周阻力及血压。目前认为,NO产生减少是妊娠高血压征合征发病的重要原因,是导致母体妊娠期心血管系统发生血容量增加、血压下降、血液重新分布等生理性改变的重要因素,胎盘局部NO及其相关因子对胎盘功能和胎儿的生长发育有直接的影响作用。     

棉酚对奶牛胎儿发育毒性的研究

用棉酚含量４．０ ｇ／ｋｇ 的棉籽饼以每头０．５ ｋｇ／ｄ 饲喂怀孕奶牛３５ ｄ,研究棉酚对奶牛胎儿发育的影响。结果表明,在开始饲喂后１４～４６ ｄ 的流产率为９．１％ （１７／１８６）;中毒的妊娠奶牛平均怀孕期为（２７５．７５±５．２１） ｄ （ｎ＝ １４０）,其所产的犊牛平均初生质量为（３５．２７±５．２３） ｋｇ （ｎ＝ １４０）,与１９９１ 和１９９３ 年同期相比较,平均怀孕期缩短２～３ ｄ,初生犊牛平均质量降低３．７０ ｋｇ;活产母犊到６ 月龄和２４ 月龄时,淘汰率分别为３９．７％ （２７／６８）和８５． ３％ （５８／６８）,６ 月龄时平均质量为（１４６．６±３３．８） ｋｇ （ｎ＝ ４５）,平均日增质量为（０．６２±０．２０） ｋｇ （ｎ＝ ４５）,分别比１９９１ 和１９９３ 年的平均值降低３４．５ 和０．１７ ｋｇ     

转EGFP基因猪胎儿神经干细胞的体外分化

 【目的】获得转EGFP基因神经干细胞并监测其自我更新、增殖和多向分化潜能;通过用EGFP对神经干细胞进行标记和体外追踪实验,为EGFP作为示踪标记对神经干细胞进行体内移植研究奠定基础。【方法】利用神经干细胞培养技术体系,从胎龄30 d猪胎儿脑组织中分离培养神经干细胞,通过脂质体介导转染技术,将EGFP基因导入神经干细胞,诱导转基因神经干细胞贴壁分化,观察其体外增殖、分化特点。采用RT-PCR技术检测干细胞和分化细胞表面标志或相关基因。【结果】成功分离培养出神经干细胞,获得转EGFP基因神经干细胞,神经干细胞在表达EGFP的同时仍具有多向分化潜能。神经干细胞中Nestin表达强阳性,NogoA、DCX、CyclinD2、CD133、Hes1、Oct4、CD-90、Nanog和Sox2表达阳性;体外诱导的神经干细胞可以分化为星形胶质细胞(表达GFAP)、少突胶质细胞(表达GalC)和神经元细胞(表达NF、NSE和MAP2);能分化为脂肪细胞(表达LPL和PPARγ-D)、成骨细胞(表达Osteonectin和Osteocalcin)、肌细胞(表达myf-5、myf-6和myoD)、内皮细胞(表达CD31、CD34、CD144和eNOS)和软骨细胞(表达COL2A1)。【结论】从猪胎儿大脑组织分离神经干细胞具有可行性和有效性,转EGFP基因神经干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能,可以用EGFP对神经干细胞进行标记、追踪,作为示踪标记进行神经干细胞体内移植研究。     

应用B-超对小尾寒羊早期胚胎和胎盘发育的研究

应用B-超监测10只健康的妊娠小尾寒羊,以研究早期胚胎和胎盘的发育过程。结果表明,早期胚体发育在妊娠第6周完成;妊娠30～46d,羊膜囊的短径与胎龄之间存在线性关系(R=0.9528,P<0.01),回归方程为Y=0.565065X 18.751970(Y:妊娠天数,X:羊膜囊宽)。胎盘发育期集中在妊娠前11周,在此期间胎盘突直径也可用于预测胎龄,二者之间的方程式为:Y=4.961429X-16.655714(Y:胎盘突直径,X:妊娠周),相关系数R=0.9882(P<0.01)。     

草食家畜母体营养对子代生命健康影响的研究进展

母体营养对胎儿基因表达的调节作用逐渐成为围产期生命营养科学研究的热点。妊娠期作为发育可塑性的关键窗口,甲基供体对胎儿发育的相关代谢基因起到修饰作用,表观遗传学可能涉及其中的分子机制。动物研究表明,母体营养供给不足或过剩都会限制胎儿的生长。结合国内外研究报道,探讨了草食家畜妊娠期母胎的营养需求、激素在稳态调节中发挥的作用以及妊娠期能量需求对妊娠健康的重要意义,概括了妊娠期草食动物营养在表观遗传学方面的研究进展,探讨了表观遗传相关技术在草食家畜育种中的应用,以期为制定草食动物妊娠期最佳营养策略、提高胚胎质量、培养高质量后代提供参考。     

利用三维超声VCI—C与MRI观察胎儿小脑蚓部发育不良对比研究

目的探讨三维超声容积对比成像C平面技术（Volume Contrast Imaging—Cplane,VCI—C）与MRI两种影像学方法在评估胎JLd,脑蚓部发育不良的价值．方法对小脑蚓部发育正常组胎儿30例和小脑蚓部发育不良组胎儿14例分别行VCI．C及MRI检查,测量胎儿小脑蚓部的高度、前后径和面积;测量脑干-小脑蚓部夹角（brainstem—vermis angle,BV角）、脑干一小脑幕夹角（brainstem—tentorium angle,BT角）,采用配对t检验评估两种影像手段的一致性．结果VCI—C技术与MRI两种方法在测量正常对照组胎儿小脑蚓部的高度、前后径和面积及BV角、BT角差异不具有统计学意义（P〉0．05）,可认为两种影像学方法在测量正常对照组胎儿小脑蚓部的高度、前后径和面积及BV角、BT角方面具有一致性;VCI－C技术与MRI两种方法测量小脑蚓部发育不良组胎儿小脑蚓部的高度、前后径和面积及BV角、BT角差异不具有统计学意义（P〉0．05）,可认为两种影像学方法在测量小脑蚓部发育不良组胎儿小脑蚓部的高度、前后径和面积及BV角、BT角方面具有一致性．结论两种方法在评估胎儿小脑蚓部发育不良方面具有一致性,VCI—C技术可作为产前诊断与鉴别诊断胎儿小脑蚓部发育不良的常规检查手段．     

Suberoylanilide hydroxamic acid,a novel histone deacetylase inhibitor,improves the development and acetylation level of miniature porcine handmade cloning embryos

Histone deacetylase inhibitors (HDACis) can change the histone acetylation and significantly enhance the developmental competence of the pre‐implantation SCNT embryo. To select a proper histone deacetylase inhibitor to improve the success rate and potentially developmental ability of handmade cloning (HMC) embryos of miniature porcine, we compared the effect of two histone deacetylase inhibitors (SAHA vs. VPA) on HMC embryo development, their histone acetylation level and the expression level of relevant genes. The blastocyst rate and number of blastocyst cells of HMC embryos treated with SAHA (SAHA‐HMC) or VPA (VPA‐HMC) were significantly higher than those of control (Control‐HMC), respectively, but there were no significant difference between SAHA‐HMC and VPA‐HMC groups. In addition, the acetylation level (AcH4K8) of Control‐HMC and VPA‐HMC embryos at the blastocyst stage, respectively, was significantly lower than that of in vitro fertilized (IVF) and SAHA‐HMC embryos. However, the acetylation H4K8 of the blastocysts had no significant difference between SAHA‐HMC and the IVF groups. The SAHA‐HMC blastocysts indicated comparative expression levels of Oct4 and HDAC1 (histone deacetyltransferase gene) with those of IVF blastocysts. In contrast, the expression levels of Oct4 were lower and those of HDAC1 were higher in the VPA‐HMC and Control‐HMC blastocysts, respectively, compared to those of the IVF blastocysts. Our results demonstrated that the HMC embryos treated by SAHA could promote the pre‐implantation development and increase the levels of histone H4K8 acetylation and the expression of the OCT4 gene, yet decrease the expression of the HDAC1 gene to the comparable level of the IVF embryos. Our results proved that SAHA may be a better histone deacetylase inhibitor for porcine HMC compared to VPA, and furthermore, it may indicate that SAHA can effectively correct the abnormal histone acetylation during the HMC embryo development and subsequently improve the full‐term developmental potential of the HMC embryos after embryo transplantation.     

出生前山羊大脑皮质的形成和发育

对山羊胚胎大脑皮质形成及其神经元发育的形态学变化进行了研究，结果表明：（1）山羊胚胎不同类型大脑皮质的皮质板形成时间顺序为旧皮质、新皮质→海马皮质，与种系发生规律相反，提示神经系统内部结构的形成并非完全符合种系进化，而与动物个体组织结构自身的发展相关。不同类型大脑皮质皮质板的分化顺序为古皮质→旧皮质→新皮质，与种系发生的顺序相符。（2）山羊胚胎海马皮质锥体细胞的发育较早，按由深到浅的次序发育，而海马皮质中的非锥体细胞于第19周开始发育。梨状叶皮质锥体细胞发育的较早，最先出现在深层，颗粒层第18周出现。大脑新皮质各层神经元发育顺序依次为：内锥体层→外锥体层、多形层→内颗粒层→外颗粒层。各种类型皮质的神经元在出生前都未发育成熟。