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1.
本试验对1头黄占鹿的耳缘皮肤组织采用0.1%胶原酶(Ⅰ型)消化组织块法进行原代培养,反复传代纯化,获得了成纤维细胞,进行了生物学特性观察,并对各代细胞进行了常规冷冻保存。利用Photoshop软件对F12代细胞染色体进行了核型分析,结果表明该黄占鹿的染色体数目为68,常染色体中1号和7号为M染色体,其余的均为A常染色体;X染色体是最大的A染色体,Y染色体是最小的M染色体;该黄占鹿的核型式为4(M)+62(A),XY(A,M);对部分冷冻细胞进行了解冻培养,解冻存活率和贴壁率分别为61.04%、38.85%。 相似文献
2.
3.
贵德黑裘皮羊耳成纤维细胞系的建立和生物学特性的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
以贵德黑裘皮羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻技术成功构建了成纤维细胞系,并对培养细胞进行了形态学、生长动力学观察、细胞活力测定、核型分析和微生物检测。结果表明:细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,冻存前细胞活力为96.2%,以DMEM/F-12+20%FBS中添加10%DMSO冻存成纤维细胞,解冻后细胞活力为93.6%,24h后的贴壁率为85%。在传代10次之前,细胞染色体中二倍体(2n=54)占主体,约为82%~90%,细菌、真菌、病毒、支原体检测为阴性。该细胞系的建立,使贵德黑裘皮羊这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来,也为体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。 相似文献
4.
5.
6.
该实验通过MTT法观察丹参、川木香、菊花、川郁金、川黄柏、川佛手、川牛膝、川莪术、川明参、川续断、川麦冬、川白芷、川芎、杜仲、川党参和乌梅等16种四川产道地药材对体外培养的鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全体积质量分数,并观察各种中药提取液对CEF增殖的影响.结果表明以上各种药材的最大安全体积质量分数:川黄柏为3.907mg/L,丹参、川木香、川续断和川党参均为7.813mg/L,菊花为15.625mg/L,杜仲、川佛手、川麦冬、川芎和白芷均为31.25mg/L,川郁金、杜仲、川乌梅和川牛膝均为62.5mg/L,川明参为1 000mg/L.当川郁金在1.954~31.25mg/L,川牛膝在3.907~31.25mg/L,川明参在1.954~500mg/L,川续断在1.954~3.907mg/L,川麦冬在1.954~15.625mg/L,杜仲在1.954~31.25mg/L的体积质量分数范围内可显著促进细胞生长. 相似文献
7.
牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存 总被引:10,自引:0,他引:10
利用牛皮肤组织块直接培养法,得到牛皮肤细胞的原代培养物,再用酶消化法和反复贴壁法处理,能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用6种分别含有二甲基亚砜(DMSO)、甘油(GL)及乙二醇(EG)的保护液,以相同的冻前处理方法,对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻,冰箱预冷平衡1-2h,逐步投入液氮(-196℃)中保存,再经37℃水浴解冻,Hanks液脱保护剂,以贴壁率评价冻存效果。结果表明,20%DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果,其平均贴壁率达87.9%。 相似文献
8.
9.
Yufei Guo Chanjuan Shen Anchun Cheng Mingshu Wang Na Zhang Shun Chen Yi Zhou 《Veterinary microbiology》2009,138(3-4):258-265
Anatid herpesvirus 1 (AHV-1) CH virulent strain was first isolated from an infected duck and it was found that this virus strain could induce cytopathic effect (CPE) in duck embryo fibroblast (DEF). Following AHV-1 infection, DEF showed morphological changes such as cell rounding, improved refractivity and detachment from the culture surface. However, its pathological characteristics were not adequately known. Related studies were performed and the results showed that syncytium formation could be observed as the other type of CPE in AHV-1 infection. Hematoxylin-eosin staining and 4’, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining of infected DEF were each used to visualize the shape and distribution of chromatin within nuclei and nuclear fragmentation was observed. Chromatin condensation and margination, as well as formation of apoptotic bodies were observed by transmission electron microscopy (TEM). DNA ladder formation was detected in AHV-1 infected cells and apoptosis of the infected DEF was also detected by flow cytometry analysis of Annexin V-FITC/PI staining method. Therefore, it was suggested that AHV-1 virulent strain can induce syncytium and apoptosis in DEF. Syncytium formation and apoptosis observed in this study may contribute to the elucidation of AHV-1 pathogenesis. 相似文献
10.
本研究旨在建立鸭胚成纤维细胞离体培养、传代以及冷冻保存体系,为鸭胚胎或生殖干细胞的离体培养奠定基础。利用胰酶-EDTA消化鸭胚胎组织,10% FBS+DEME营养液培养,获得原代和传代成纤维细胞。分别用DMSO、甘油以及乙二醇作为冷冻保护剂对F1代鸭胚成纤维细胞进行冷冻保存,检测复苏后细胞的生长情况。利用此方法可以获得高活性的鸭胚成纤维细胞,并可成功传至第三代。其中F1代与F2代细胞活力最好,达到90%以上。3种冷冻剂保存的细胞复苏后均与F1代细胞的活力存在明显差异,均小于80%,其中用DMSO冷冻保存的细胞复苏后活力最强,生长密度保持较好。 相似文献