优化山羊体细胞核移植方案的研究

以乳腺细胞、胎儿成纤维细胞和颗粒细胞为供体细胞进行核移植，比较了供体细胞类型、细胞冷冻及核移植的重建方法（胞质内注射、电融合）对重构胚早期发育的影响。结果：（1）乳腺细胞支持重组胚的发育能力（囊胚率7．14％）显著低于成纤维细胞（16．19％）和颗粒细胞（19．01％）（P〈0．05），卵裂率无显著差异（P〉0．05）；（2）乳腺上皮细胞构建重组胚时电融合法的效率（69．52％）极显著高于胞质注射法（59．20％）（P〈0．01）；成纤维细胞的重组成功率、卵裂率和囊胚率在两种方法间均无显著差异（P〉0．05）；在颗粒细胞，胞质注射法重组成功率（82．17％）显著高于电融合法（50．99％）（P〈0.05），其囊胚率也稍高于电融合法，但无显著差异（P〉0.05）；（3）上述3种供体细胞在冻融后支持重组胚发育力方面无显著差异（P〉0.05）。结论：在山羊体细胞核移植中，上述3种细胞支持重组胚的发育力以成纤维细胞和颗粒细胞较好；细胞冷冻对其无显著影响；在构建重组胚方法上，乳腺细胞以电融合法为宜，颗粒细胞是胞质注射法优于电融合法，而成纤维细胞两种方法均可。