卡氏住白虫裂殖子和配子体的超微结构

卡氏住白虫(Leueocytozoon caulleryi的裂殖子和配子体是从天然感染鸡的外周血液、肝、脾及其他内脏组织采取。通过透视电镜观察其超微结构,裂殖子呈圆形或卵圆形,外包有两层膜,外膜较薄,内膜比较厚,内含有一个圆形或卵圆形的核,在核中央有一核仁、核酸糖小体、食物空泡,具有一个管状嵴的线粒体和1～2个脂类包含体。 卡氏住白虫雄性和雌性配子体都具有三层明显的膜,但成熟的配子体仅见到两层膜。雌雄配子体含有细胞核、核仁、核酸糖小体、食物空泡、管状嵴的线粒体、内质网、雄配子体较小而细胞核较大。雌配子体染色较雄配子体深,并含有较发达的内质网。     

鸡卡氏住白细胞原虫各期虫体形态结构的观察研究

采取同居感染病鸡的外周血液 ,观察研究鸡卡氏住白细胞原虫 (LeucocytozoonCaulleryi)不同发育阶段的裂殖子和配子体的形态特点。光镜下 ,裂殖子呈圆点状 ,胞核圆形 ,着染紫红色 ,胞浆少量呈淡蓝色 ,位于血浆和血细胞内 ,配子体呈圆形或椭圆形 ,雌配子体 (大配子体 )虫体深蓝色 ,核较小 ,呈深粉红色 ,平均直径 16 6 5× 15 79μm ,雄配子体 (小配子体 )为淡蓝色 ,核较大 ,染色较雌配子体浅 ,平均直径为 11 2 7× 11 10 μm。电镜下 ,裂殖子呈圆形或卵圆形 ,外包有两层膜 ,外膜较薄 ,内膜较厚 ,内包一个圆形或卵圆形的核 ,位于红细胞细胞质内早期发育的配子体呈球形 ,表面隐约可见两层膜 ,细胞核大而淡染 ,位于中央 ,核膜呈双层 ,中间有明显的空隙 ,细胞质内可见数量不等的细微颗粒。     

鸡卡氏住白细胞病病原学研究和防治技术

[目的]为鸡卡氏住白细胞虫病的防治提供依据。[方法]通过血液涂片检查、病鸡剖检、组织印片及人工接种试验对信阳地区病鸡体内和组织切片中各期病原体的形态变化观察,总结其流行规律和典型病状,并提出其防治技术。[结果]信阳市鸡卡氏住白细胞虫体在血液细胞内发育各期形态变化与国内外报道基本相同。大配子平均大小14.86μm,小配子体平均大小12μm。大配子体的数量比小配子体多。在鸡细胞内外除第3、4期配子体外,还有裂殖子。裂殖体直径为27~68μm。[结论]可在鸡饲料中添加中西药物来预防和治疗鸡卡氏住白细胞虫病。     

卡氏住白细胞虫rDNA ITS-2的POR扩增与测序

运用PCR方法扩增了卡氏住白细胞虫rDNA的ITS-2及部分5．8S和28S序列(ITS2 )，并对该序列进行了克隆和测序。采用巨型裂殖体为材料，并根据Saccharomyces cerevisiae rDNA中的5．8S、28S保守序列所设计的通用引物ITS3、ITS4，进行了虫体ITS2 的PCR扩增，将所扩增片段纯化后成功地克隆于pGEM-T easy和PMDl8-T载体的T-T窗口。经双向自动测序显示，该ITS2 片段的大小为270bp；经NCBI Blast联机检索，结果显示，所扩片段中5．8S序列与S．cerevisiae的5．8S序列有部分相同，而ITS-2序列为虫体所特有；同时经wDNA-SIS软件分析，显示该ITS-2序列与S．cerevisiae间同源性相对较远，而与柔嫩艾美耳球虫间同源性相对较近，故而本试验中所测序列为卡氏住白细胞虫的ITS-2特有序列。     

血虫净缓释剂的研制及预防鸡卡氏住白细胞虫病效果的评价

采用缓释剂制备技术研制了血虫净缓释注射液，该制剂药物包裹量大，析出量小，粘度均匀，3000r/min离心15分种不分层，且粘度小，便于肌肉注射使用。用含4％血虫净的缓释注射液，以0.5mL只和1mL／只的量分别注射50只110日龄健康海兰白鸡。结果用以上两种剂量给鸡注射，都可有效预防本病一个月，而同时对照的含4％血虫净的水溶剂组没有预防作用。     

人工感染鸡卡氏住白细胞原虫病的病理形态学

30 0日龄新罗曼蛋白鸡 40只 ,以混群感染的方式感染卡氏住白细胞原虫病 ,在不同感染阶段剖杀 ,观察试验鸡心、肝、脾、肺、肾、肠、胰、肌肉等器官的病理变化。结果表明 ,感染后各内脏器官普遍出现充血、出血、坏死和血管壁纤维化等病变 ,尤其以肾被膜下和卵巢的出血及肝、脾的凝固性坏死为严重。一些坏死病灶内出现上皮样细胞、浆细胞、淋巴细胞、假嗜伊红性白细胞增生 ,形成类似仔猪副伤寒结节的增生性结节。同时 ,在肝、脾、肺、肾中可见特征性的巨型裂殖体结节。     

卡氏住白虫病PCR诊断方法的建立

根据已测得的卡氏住白虫ITS-2序列，在3'端设计一种特异引物，另外采用一个位于5’端的保守引物，建立了鸡卡氏住白虫病的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验表明，该诊断方法与其他虫体如疟原虫，弓形虫，微孢子虫，球虫等无交叉反应性，能检测的卡氏住白虫最低DNA浓度为1000fg，可用于本病的早期诊断。     

鸡卡氏住白细胞虫病的免疫学研究进展

鸡住细胞白虫病是一种常见、多发的禽类原虫病,文章从免疫机理、疫苗的研究、免疫诊断与治疗三个主要方面,对白冠病病原之一的卡氏住白细胞虫的免疫学研究情况进行了综述。     

卡氏住白细胞虫在鸡体内的发育及与库蠓的关系

将健康鸡与卡氏住白细胞虫病鸡混养,其间加入一定量库蠓,经１２～１３ｄ后出现明显的临诊症状（贫血、排绿便等）。第９ｄ血片检查出少量裂殖子,至１３～１４ｄ染虫率达到最高峰,至１８～２０ｄ找到成熟的大、小配子体。在病鸡、病愈鸡的血涂片中,均可见到数量不等的Ⅱ期裂殖子,持续时间达３５ｄ以上,证明有带虫鸡存在。调查地主要有尖喙库蠓、荒川库蠓和大熊库蠓存在,以尖喙库蠓比例最大,占９３．４％,是本地的优势种。     

PCR Amplication and Sequencing of ITS-2 rDNA of Leucocytozoon caulleryi

The second internal transcribed spacer (ITS-2) of Leucocytozoon eaulleryi was amplified byPCR using a pair of conserved primers and cloned into the T-T windows of plasmid pGEM-T easy vector. Theinserts were successfully sequenced and the results revealed that the ITS-2 plus flanking sequence (ITS2-+-) wascomposed of 270 nucleotides, and the ITS-2 was 113 bp in length. The ITS-2 of L. eaulleryi was analysed byNCBI Blast, and the degree of homology of the ITS-2 of L. caulleryi was compared with that of Eimeriatenella, Candida tropicalis and Saccharomyces kluyveri and others by wDNASIS. The results showed that theITS-2 of L. caulleryi is characteristic and has the greatest similarity with E. tenella (21.2%).