丝胶茧蚕品种选育初报

利用家蚕资源库中的突变基因,初步育成了丝胶茧蚕品种。导入了与活性物质黄酮类产生有关的基因,使丝胶中含有特殊的功能性活性物质。为丝胶的保健食用和高档化妆品利用提供原料。     

Sericin Accelerates the Production of Hyaluronan and Decreases the Incidence of Polyspermy Fertilization in Bovine Oocytes During In Vitro Maturation

Fetal bovine serum (FBS) has been widely used as a supplement in the maturation medium of bovine oocytes in vitro. However, serum contains many undefined factors and is potentially infectious to humans and animals. As a serum replacement, we evaluated the feasibility of using the silk protein, sericin, derived from the cocoons of silkworm. To examine the rates of oocyte maturation and fertilization, cumulus-oocyte complexes were cultured in TCM-199 supplemented with 0.01%, 0.05%, 0.1% or 0.15% sericin or 5% FBS. The sizes of the perivitelline space that might relate to polyspermy, the expressions of Has2 and CD44 mRNA, the amount of hyaluronan (hyaluronic acid: HA) contained in the oocytes and the rates of blastocyst formation following insemination were then compared between the oocytes cultured with 0.05% sericin and 5% FBS, because the polyspermy rates in oocytes cultured with 0.05% sericin were significantly lower than in those cultured with 5% FBS. After in vitro maturation (IVM), the mean size of the perivitelline space was significantly greater in oocytes cultured with sericin than in those cultured with FBS, although the rates of nuclear maturation, fertilization and blastocyst formation of oocytes under both IVM conditions were not significantly different. The expression of HAS2 and CD44 mRNA and the amount of HA in the denuded oocytes cultured with 0.05% sericin were significantly greater than in those cultured with FBS. These results indicate the feasibility of sericin as an alternative protein supplement for IVM in bovine oocytes.     

蚕丝脱胶方法的比较分析

对高温高压水、尿素溶液和碳酸钠溶液煮沸的蚕丝脱胶方法作了比较研究。结果表明 ,蚕丝在高温高压条件下丝胶蛋白易于溶解 ,脱胶率达 80 %以上 ,获得的丝胶分子量大 (10～ 2 0 0kD) ;在碱性的碳酸钠溶液中煮沸脱胶 ,丝胶蛋白易于降解或水解 ,其回收的丝胶分子量 2 0kD以下。蚕丝在高温高压水或高温高压尿素溶液中的脱胶率都随着处理温度和压力的增大而提高 ,而回收的丝胶蛋白分子量随着处理温度和压力的增大而下降。高温高压水蚕丝脱胶法是一种高效率、低成本、无污染的脱胶方法 ,特别适用于绢纺厂、丝棉厂等蚕丝的脱胶与加工以及纺织厂生丝的精练等。     

丝胶溶解条件、组分及结构特性的研究

探讨了H_2O、1％SDS高温极短时间抽提丝胶和LiBr、NaSCN、CaCl_2浓溶液溶解丝胶对丝胶的破坏性。用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了丝胶的肽链组分和分子量,归纳出丝胶含有约25种肽链,它们的分子量约从14000到256000。指出丝胶分子中含有两条肽链通过二硫键连结的结构。     

用热水解法制备不同分子质量丝胶粉的溶解性差异及其成因探讨

用沸水法和高温高压热水法提取丝胶溶液,分别在90℃热水中进行二次降解处理,获得具有不同分子质量分布范围的各种热水解丝胶溶液,经冷冻干燥制成丝胶粉。对各种丝胶粉的热水溶解性差异比较和成因探讨表明,热水二次降解能够提高丝胶的水溶性,降解处理时间越长,其水溶性越大;丝胶的分子质量大小能显著影响其溶解性,而丝胶的结晶结构含量对其溶解性的影响较小。研究结果有助于对不同溶解性丝胶的有效利用。     

丝胶凝胶物理性状的研究

丝胶在凝胶化时,强力增加,而表面张力减小。丝胶凝胶,在30～40℃热水处理时,溶解量很小;50一70℃热水处理时,溶解量增多,溶解速度呈恒定状态;80℃以上,呈快速溶解。根据丝胶凝胶的DTA分析,其吸热分解峰向高温侧移动,这表明丝胶分子的有序性、结晶度提高了。丝胶凝胶在热水处理时,转化为液胶,同时丝胶分子也由β构象转化为无视卷曲结构。并且,丝胶液胶又可重新凝胶化。     

固化茧丝的丝胶稳定性检测和染色性试验

固化茧丝的丝胶稳定性及染色性直接关系丝胶固着丝绸产品的市场开发前景。通过测定丝胶溶失率、耐洗涤性能和上染率及红外光谱,研究了固化茧丝的丝胶稳定性及适用的染料和部分染色工艺条件。检测结果表明固化茧丝的丝胶溶失率比普通茧丝低,丝胶性能稳定,90℃条件下固化茧丝的丝胶溶失率只有1.6%;红外光谱显示固化茧丝的分子结构发生了一定改变;活性染料和酸性染料对固化茧丝的上染试验显示酸性染料的上染率高于活性染料,但其染色均匀性不及活性染料,活性染料和酸性染料对固化茧丝的最高上染率分别为67.9%、68.5%;适宜固化茧丝纤维上染的温度为70℃,用酸性染料上染固化茧丝不宜采用强酸性浴。     

4株家蚕丝胶蛋白降解细菌的分类鉴定与培养温度研究

从缫丝厂废水池分离获得4株对家蚕丝胶蛋白具有较强降解活性的细菌。通过菌落的形态特征和生理生化特征分析及16S rDNA序列测定与同源性分析,对4株细菌进行分类鉴定的结果是:S45、Y3菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),S68、X10菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。温度对丝胶蛋白降解细菌的降解活性有影响,在培养温度为30℃时,S45、Y3、S68、X10菌株对家蚕丝胶蛋白的降解活性最高,其降解率分别为26.52%、20.27%、21.55%和28.86%。由于芽孢杆菌具有很强的耐热等抗逆能力,所以4株丝胶蛋白降解细菌有望应用于缫丝厂排放废水的处理。     

上蔟环境与蚕茧物理性状的研究

蚕在高温多湿的环境中营茧,茧丝静剥离抵抗大,茧色黄而深浓,茧层丝胶在热水中的初期溶解率低,DSC曲线上的吸热分解峰在高温侧出现,且吸热峰强度大而陡,茧层丝胶分子中存在着β结构和无(?)卷曲结构.而在适温适湿的环境中营茧,外观形质好.茧层丝胶分子为无规卷曲结构.试验证明,家茧解舒的恶化是由于茧层丝胶分子结构变化所致.     

家蚕5龄幼虫不同时期中部丝腺细胞蛋白质双向电泳分析

对5龄家蚕不同发育时期的中部丝腺细胞蛋白质变化进行分析研究,有利于发现与丝胶蛋白分泌有关的功能蛋白质。采用蛋白质双向电泳和图像分析技术,发现同一区段的家蚕中部丝腺细胞在5龄第2天、第4天和熟蚕期的蛋白质组成具有显著差异:中部丝腺前部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有8个,第4天有16个,熟蚕期有24个;中部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有9个,第4天有33个,熟蚕期有30个;后部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有10个,第4天有7个,熟蚕期有25个。