早籼稻饲粮中添加NSP酶对生长猪生长与消化性能的影响

研究了早籼稻饲粮中添加NSP酶对生长猪生长与消化性能的影响。结果表明：与对照组比较,早籼稻饲粮中添加NSP酶制剂使生长猪日增重提高了8.78%(P<0.05),料重比降低了9.42%(P<0.05)。粗蛋白、粗脂肪和粗纤维的表观消化率分别提高了18.76%(P<0.01),16.04%(P<0.05),108.57%(P<0.05)。猪的腹泻率、粪便大肠杆菌数分别下降了37.00%(P<0.05)和81.29%(P<0.05);十二指肠、空肠和回肠内容物粘度分别降低了2.8%(P>0.05); 7.08%(P<0.01)和6.78%(P<0.01)。十二指肠内容物中总蛋白水解酶和α-淀粉酶活性分别显著提高了99.07%(P<0.01)和18.41%(P<0.05);胰蛋白酶和脂肪酶活力有升高趋势,但差异不显著(P>0.05)。     

公猪精液PRRSV变异株检测及NSP2、ORF5基因序列分析

用荧光RT-PCR方法从某猪场精液中检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异株(NSP2 1 594～1 680 bp缺失)核酸阳性.提取1份阳性样品病毒核酸测定和分析其NSP2和OBF5全基因序列,结果表明NSP2基因由950个氨基酸组成,与CH-1a、VR-2332等经典PRRSV相比481位缺失1个氨基酸、532～560位连续缺失29个氨基酸,与JXA1、HUN4等毒株具有相同的缺失特性;ORF5基因第13、151位为具有强毒特性的精氨酸(R),存在4个潜在的糖基化位点,分别位于30～32、35～37、44～46和51～53位氨基酸.遗传进化分析表明,测定序列与JX-A1、HUN4等毒株关系最近,与CH-1a、NVSL等同属一个大分支,而与BJ-4、P129、RespPRRS MLV、VR-2332等处于不同分支.研究证实公猪精液可携带PRRSV变异株,因此猪场(群)在人工授精和引进精液时必须强化检疫和生物安全措施.     

NSP酶制剂对生长鹅小肠食糜黏度及盲肠微生物数量的影响

选择300只29日龄生长鹅进行28 d的饲养试验,研究在高纤维基础日粮中分别添加0.2%和0.4%的NSP酶制剂对生长鹩小肠食糜黏度及盲肠微生物数量的影响.对小肠食糜黏度的研究结果显示:0.2%与0.4%的NSP酶制剂对十二指肠食糜相对黏度的下降幅度分别为9.43%和10.69%(P<0.05),对空肠食糜相对黏度的下降幅度分别为10.74%和12.81%(P<0.05),对回肠食糜相对黏度的下降幅度分别为14.11%和15.03%(P<0.05).对盲肠微生物数量的研究结果显示:0.2%与0.4%的NSP酶制剂对盲肠大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌均无显著影响(P>0.05).     

一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的全基因组序列分析

为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对某猪场疑似患有猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的猪组织样品进行鉴定,测序获得全基因,并对该毒株的NSP2基因缺失特征同源性和遗传进化及重组情况进行分析。结果显示:该猪场感染猪体的病原体为PRRSV,该毒株被命名为180404-2fei;180404-2fei毒株的NSP2区存在131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失,与报道的类NADC30毒株缺失特征一致;180404-2fei的NSP2基因与NADC30毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为92.2%和90.1%,180404-2fei毒株的ORF5基因与NADC30的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.5%和92.0%;遗传进化和重组分析结果表明,180404-2fei毒株属于NADC30-Like亚群,可能是由NADC30与HP-PRRSV重组而来。本研究通过对一株类NADC30 PRRSV的全基因组序列进行分析,为研究PRRSV的遗传变异和PRRS的防控提供了参考依据。     

The fermentative capacity of growing pigs and adult sows fed diets with contrasting type and level of dietary fibre

Adult sows have a more developed gastro-intestinal system than young growing pigs resulting in a superior capacity to digest fibrous components. The main objective of this study was to describe the capacity of sows and growing pigs to digest the fibre components in concentrated low dietary fibre (DF) diet and two high DF diets similar in DF but with contrasting DF solubility. Six sows and four growing pigs were fitted with a simple T-cannula at the terminal ileum. Each balance experiment consisted of a 7-day initial period followed by a 3-day collection of faeces and a 2 or 3-day collection of ileal digesta for growing pigs and adult sows, respectively. When feeding diets with high proportions of soluble non-starch polysaccharides (NSP), the difference in fermentation capacity between growing pigs and adult sows was small. The adult sows showed a higher fermentative capacity, evidenced by a higher fermentation and a higher methane production, when high fibre diet with high amount of insoluble fibre was fed.     

香蕉束顶病毒海口分离物NSP基因的原核表达

应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆NSP (Nuclear shuttle protein)基因的编码区,并通过Gateway技术定向重组到原核表达载体pDEST~(TM)-17中的6xHis标签下游,经菌落PCR和测序鉴定结果表明,成功构建了原核表达载体pDEST~(TM)-17-NSP.阳性克隆转化Ecoli BL21(DE3),经IFFG诱导表达、SDS-PAGE分析和western blot检测,结果显示,融合蛋白以包涵体的形式稳定表达,分子量约为20 ku,与预计值相符.通过诱导条件的优化,确定了最佳的融合蛋白表达条件为25℃、0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4h.从而为制备NSP多克隆抗体和进一步研究NSP的功能奠定了基础.     

Combined effect of using near‐infrared spectroscopy for nutritional evaluation of feed ingredients and non‐starch polysaccharide carbohydrase complex on performance of broiler chickens

This study was carried out to evaluate the combined effect of using near‐infrared spectroscopy (NIRS ) for nutritional evaluation of feed ingredients and the addition of non‐starch polysaccharide carbohydrase complex (NSP enzymes) on the growth performance of broilers fed diets produced with low‐quality wheat and soybean meal. A 2 × 2 trial design was performed, with seven replicates of 40 male Ross 308 broilers per treatment, evaluating the effect of the addition of NSP enzymes and the ingredients’ nutritional matrix based on table values or NIRS values. Diets without added enzymes were formulated to reach nutritional requirements, whereas diets with enzymes were reformulated, reducing the apparent metabolizable energy (AME ) by 85 kcal/kg. In the overall period (days 0–35), broilers fed diets formulated using NIRS values had higher (P  < 0.001) average daily gain (+11.3%) and daily feed intake (+7.2%), and a lower (P  < 0.001) feed conversion ratio (?5.3%) compared to those fed diets formulated using table values. When formulating diets for broilers with low‐quality feed ingredients, performance can be improved by considering NIRS values and by the addition of NSP enzymes, even with a reduction of AME . These nutritional approaches are efficient in improving broilers’ performances by themselves and even more so when they are combined.     

小麦日粮添加非淀粉多糖酶制剂对雏鸡生长及血液中血糖、尿酸和某些激素水平的影响

2个系列试验研究小麦日粮添加非淀粉多糖酶制剂对雏鸡生长及血液中血糖、尿酸和某些激素水平的影响。试验1将7日龄雏鸡72羽随机分为3组,即小麦基础日粮组、小麦日粮加0.15％浙江酶-1组和小麦日粮加0.15％赤峰酶组。试验2将7日龄雏鸡248羽,随机分为8组,即玉米基础日粮组、小麦基础日粮组、小麦日粮加0.1％、0.2％、0.5％浙江酶-2组和小麦日粮加0.1％、0.2％、0.5％芬兰酶组。试验1结果表明,和小麦组相比,添加0.15％浙江酶-1组雏鸡增重显著提高(P<0.05),料重比下降但不显著(P>0.05);而添加0.15％赤峰酶组增重提高,料重比下降,但均未达到显著(P>0.05)。试验2结果表明,和小麦日粮组相比,添加浙江酶-2各组雏鸡增重提高9.3％～15.7％(P<0.01),料重比降低6.3％～10.8％(P>0.05);添加芬兰酶各组雏鸡增重提高6.2％～9.7％(P<0.05),料重比降低4.2％～13.3％(P<0.05);添加酶各组和玉米组相比,雏鸡增重无明显差异。试验1和试验2血液指标测定结果表明,小麦日粮添加酶制剂可使雏鸡T4、IGF-1水平显著提高(P<0.05),对T3、胰岛素、血糖和尿酸含量未发现明显影响(P>0.05),提示酶制剂可以通过影响机体的代谢激素促进雏鸡生长。     

口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因在昆虫细胞中的表达及应用

研究口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP) 2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面的意义.本研究将FMDV NSP 2C基因,克隆到穿梭载体pFast-bac- HT-B,将其转入含骨架载体Bacmid的DH10Bac,经蓝白斑筛选得到重组骨架质粒Bacmid-2C.将Bacmid-2C转染昆虫细胞Sf9,鉴定正确后,经3次增殖获得高滴度的P-3代病毒后,在High Five细胞中进行目的蛋白的表达.SDS-PAGE结果显示在High Five细胞中得到了相对分子质量约为38.93 ku的目的蛋白2C,Western blotting及Dot-ELISA结果显示,该表达产物对FMDV感染动物阳性血清有良好的反应性.以电泳纯化的2C蛋白为抗原建立间接ELISA,检测健康非免疫动物、免疫动物及FM-DV试验感染动物血清,结果表明2C-ELISA不但能区分免疫动物和感染动物的血清,而且还能检测FMDV感染早期动物血清中的2C抗体.说明昆虫细胞表达的2C蛋白可作为FMDV疫苗免疫动物与自然感染动物鉴别诊断的良好抗原.2C基因在Bac-to-Bac系统中的成功表达为建立通过检测几种NSP抗体,筛查感染及隐性带毒动物,净化畜群的方法奠定了基础.     

生长肥育猪节粮型配方技术研究

试验研究小麦杂粕型日粮添加不同非淀粉多糖酶制剂对生长肥育猪生产性能的影响,为开发节粮型日粮提供依据。选取体重(59.15±1.56)kg的健康杜×长×大三元杂交猪87头,按体重随机分为3个处理,每个处理3个重复。试验1组饲喂基础日粮+酶制剂1,试验2组饲喂基础日粮+酶制剂2,试验3组饲喂基础日粮+酶制剂1+酶制剂3。结果表明:小麦杂粕日粮中添加酶制剂可使生长肥育猪日增重达973g,料肉比达2.26;其中试验3组日增重显著高于试验1组(P<0.05),试验2组与试验1组和试验3组差别不显著;料肉比试验3组最低,其次为试验2组和试验1组。结论:小麦和杂粕中添加合适的酶制剂可以达到和玉米豆粕同样的生产性能,生长肥育猪日粮中至少可以替代46%的玉米豆粕。