腺苷酸激活蛋白激酶信号通路及其在动物应激过程中的调节功能

腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)是一种在真核细胞生物中广泛存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,作为细胞内最重要的能量感受器,AMPK在细胞生长、繁殖、维持机体能量平衡以及细胞代谢过程中发挥重要的调节作用。AMPK活化主要受细胞内一磷酸腺苷/三磷酸腺苷(AMP/ATP)水平及肝激酶B1、钙调素依赖蛋白激酶活性等因素的影响;在动物处于营养缺乏、热应激、氧化应激等环境中,AMPK通路能做出适应性调整,以降低应激环境对动物的负面影响。本文对AMPK的结构、活性调节以及对处于应激环境中的动物能量代谢的调节进行综述,为缓解畜禽各种应激综合征提供理论参考。     

基于iTRAQ技术分析家蚕微孢子虫感染家蚕精巢的蛋白质组表达变化

为了获取家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)与宿主家蚕之间互作的新线索,利用定量蛋白质组学同位素标记相对定量和绝对定量(i TRAQ)技术分析感染与未感染Nb的家蚕5龄末幼虫精巢组织的蛋白质组表达变化,在置信度≥95%的1 326个蛋白质中,共发现78个蛋白质的表达量发生了变化,其中63个蛋白质表达上调,15个蛋白质表达下调。GO注释差异表达蛋白质参与了14个生物学过程,以参与代谢过程和细胞内过程的蛋白质占比较高;参与的细胞组分有9个,以胞外结构域占比较高;参与的分子功能有4个,以催化活性及蛋白质结合的占比较高。KEGG通路分析差异表达蛋白质共参与57个信号转导通路,主要包括代谢通路,甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢通路以及溶酶体途径。利用qRT-PCR测定随机选取的8个差异表达蛋白质的编码基因mRNA转录水平变化,结果有5个基因mRNA的转录变化与i TRAQ检测蛋白质的表达变化趋势一致,而另外3个基因mRNA转录变化与蛋白质的表达变化不一致。研究结果显示差异蛋白质与能量代谢、氨基酸转运、发育调节、免疫调控等多个生物学过程有关,提示Nb与宿主家蚕之间存在复杂的相互作用关系。     

黄酮类化合物抗炎作用及其作用机制研究进展

自二十世纪30年代初,黄酮类化合物被发现以来,其抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血压、防止骨质疏松等药理作用备受关注。由于目前临床上应用较多的甾体和非甾体抗炎药有胃肠道损伤、高血压、急性肾功能衰竭等不良反应,而黄酮类化合物不仅具有抗炎作用,又具有毒副作用小和作用范围广的特点,因此,引起了相关研究学者的重视。本文通过查阅近年来国内外发表的相关文献,从炎症产生的重要途径,如花生四烯酸,NO途径,细胞因子及受体,以及Nrf2、NF-κB、AP-1和MAPK等信号通路来探讨黄酮类化合物抗炎作用机制,以期为开发抗炎中药提供理论基础和研究思路。     

Wnt信号通路对小鼠结肠炎症及肠道功能细胞的影响

本试验旨在研究Wnt信号通路对小鼠结肠形态结构、细胞炎性因子和肠道功能细胞的影响。选取18只8周龄雄性C57BL/6小鼠，随机分为对照组和Wnt抑制剂组。Wnt抑制剂组给与小鼠腹腔注射5 mg/kg体重的LGK974，每天1次，持续7 d；对照组注射等量体积的二甲基亚砜（DMSO）。饲养至第9天处死，取小鼠结肠组织待测。结果表明：(1)与对照组相比，LGK974组小鼠体重从第5天开始显著下降，第6至8天极显著下降，且疾病活动指数极显著上升；(2) LGK974组的小鼠结肠长度不受影响，但隐窝深度显著降低，且隐窝的完整性遭到明显破坏；(3) LGK974组的结肠炎性细胞因子IL-6和IL-1β的mRNA表达均显著上调，且TNF-α表达有上调的趋势；(4) LGK974处理能降低结肠Wnt信号通路关键基因Wnt3a和Axin2的mRNA相对表达量；(5) LGK974组的结肠PCNA、Ascl2、Lgr5、Muc2、ChgA和Villin基因mRNA表达显著下降，且Alpi基因的mRNA表达有降低的趋势。以上结果表明抑制Wnt信号通路能破坏结肠的隐窝结构，诱发炎症反应，并导致结肠各种功能细...     

氨基酸介导的TOR信号传导通路研究进展

TOR(target of rapamycin)是一种进化上十分保守的丝氨酸(Ser)/苏氨酸(Thr)蛋白激酶,可以感知营养状况、能量、生长因子等信号,进而调节细胞的生长、增殖和凋亡等生理进程.本文综述了TOR的上、下游信号传导通路及各种氨基酸对TOR信号传导通路的影响,为探讨氨基酸调控蛋白质合成的作用机制及建立精确...     

小G蛋白Ran对奶牛乳腺上皮细胞mTOR和Jak2/Stat5信号通路的影响

为探讨小G蛋白Ran对β-酪蛋白合成的主要信号通路mTOR和Jak2/Stat5及其增殖的影响,本研究对Ran进行瞬时转染和稳定转染,Western blot检测细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达;高压液相层析仪检测酪蛋白的分泌量;CASY细胞活力分析仪分析细胞活力。结果显示,Ran过表达时,细胞活力显著增加(P0.01),细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达均也显著增加(P0.01);表明Ran可能激活细胞中的mTOR通路和Jak2/Stat5通路,对乳腺上皮细胞的泌乳与增殖有正向调节作用。     

复方中药超微粉对蛋鸡抗氧化性能及相关基因表达的影响

本文旨在研究复方中药超微粉对产蛋后期蛋鸡抗氧化性能的影响。选取307日龄的新杨黑羽蛋鸡216只，随机分为3组，每组8个重复，每个重复9只。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础饲粮中添加0.5%丹参+0.25%女贞子+0.25%蒲公英(复方1)、0.3%益母草+0.2%丹参+0.25%女贞子+0.25%蒲公英(复方2)的超微粉。于试验第60和120天采集蛋鸡血浆和肝组织，测定氧化-抗氧化指标及相关基因表达。结果发现：与对照组相比，试验第60天，复方1组蛋鸡血浆和肝组织MDA含量显著降低、肝NQO1和GST的mRNA表达量显著上调(P<0.05),复方2组蛋鸡肝组织GSH-Px2、GSH-Px3、GSH-Px4、SOD2、SOD3、TXNRD1、TXNRD3、NQO1和HO-1的mRNA表达量显著上调(P<0.05),复方1组和2组蛋鸡肝组织GSH-Px、SOD和CAT活性以及T-AOC显著增加(P<0.05);试验第120天，复方1组蛋鸡肝组织MDA含量显著降低(P<0.05),复方2组蛋鸡血浆CAT活性显著增加、肝组织Nrf2和GSH-Px2的mRNA表达量显著...     

Preliminary Study on NF-κB Signaling Pathway Regulating Brucella Intracellular Survival Molecular Mechanisms

By the infection of Brucella virulent strain and attenuated strain in mice macrophage RAW264.7,the assay was aimed to explore the relationship between NF-κB signaling pathways and Brucella virulent strain and attenuated strain in intracellular survival.Use different MOI Brucella (2308,RB51,16M and M5) to infect mice macrophage RAW264.7,after 0,4,8 and 24 h infected,cracking cell and collecting supernatant,we detected the effect of Brucella on activation of NF-κB signaling pathway by Western blotting.Different concentrations of NF-κB signaling pathway inhibitor were incubated with mice macrophage RAW264.7,with different multiplicities of infection (MOI) of Brucella infecting cells,ELISA kits to detect the expressions of TNF-α,IL-1β and IL-6 cytokine;At the same time,count the number of intracellular bacteria of CFU.The results showed that rough cattle Brucella strains RB51 could strongly activate NF-κB signaling pathway,smooth cattle Brucella strains 2308 was weak in the activation;At the same time,the activation of NF-κB signaling pathway was concentration dependent.When the MOI was 80,infection time was 8 h,NF-κB activation degrees of rough cattle Brucella strains RB51 and smooth cattle Brucella strains 2308 were the strongest,and this pathway was involved in producing TNF-α and IL-6;NF-κB signaling pathway inhibitor BAY11-7082 affected Brucella intracellular survival.So rough cattle Brucella strains RB51 intracellular survival and NF-κB signaling pathway activity were closely related.The results laid the foundation for the further study of Brucella intracellular pathogenesis,also provided scientific basis for the research of new drugs to Brucella,and prevention and treatment of brucellosis.     

银耳多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用及PI3K/Akt、NF-κB信号通路的影响

试验旨在探讨银耳多糖（TFP）对小鼠脾淋巴细胞免疫调节作用及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B (Akt)、核因子κB (NF-κB)信号通路的影响。试验从体外分离小鼠脾淋巴细胞，分别设CK组、LMS组、TFP 20 mg/L组、TFP 40 mg/L组、TFP 80 mg/L组和TFP 160 mg/L组。采用MTT法检测脾淋巴细胞的增殖，ELISA法检测脾淋巴细胞细胞因子白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ (IFN-γ)的分泌，QRT-PCR法检测脾淋巴细胞细胞因子IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γm RNA的相对表达量，Western blot法检测PI3K/Akt和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示，银耳多糖能够促进脾淋巴细胞的增殖、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γ的分泌及mRNA的表达（P<0.01），降低磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（P-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B (P-Akt)、κB抑制因子激酶α (IKK-α)、κB抑制因子激酶β(IKK-β)和NF...