多角体蛋白基因核苷酸序列对HBsAg(PreS2+S)在家蚕中表达的作用

应用PCR突变的方法 ,在乙肝病毒表面抗原 (HBsAg)前S2序列的 5’端融合了BmNPV多角体蛋白基因5’端的 12个碱基 ,获得了融合乙肝表面抗原中蛋白基因 (HBMp) ;通过同源重组将其插入到BmNPV基因组多角体启动子后 ,构建了重组杆状病毒BmPAK HBMp。用重组病毒BmPAK HBMp和BmPAK HBM(带有非融合乙肝表面抗原中蛋白基因 )感染家蚕细胞及蛹 ,对两种病毒的表达产物用ELISA进行了跟踪检测 ,结果表明融合蛋白比非融合蛋白HBsAg活性提高了 6 0 %～ 80 % ,作为HBsAg构成部分的PreS2抗原性提高了 8～ 10倍 ;并且HBsAg和PreS2 Ag表达的时相曲线不同 ,PreS2 Ag的表达量比HBsAg早 1～ 2d达到最大值。ELISA检测和Westernblotting分析表明 ,多角体基因序列的存在更有利于中蛋白全基因 (PreS2 +S)的表达。     

应用PCR技术检测HBsAg携带者血清中HBV DNA

应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增38例 HBsAg 携带者和58例正常人血清中的HBV DNA 特异性片段,通过与 HBsAg 滴度及 HBV 血清标志物进行对比分析发现 HBV DNA 阳性率与 HBsAg 滴度呈正相关(r=0.981,p<0.005),与 HBeAg 减低,抗-HBe 产生以及其后的 e系统消失过程呈相应递减趋势。并且在单项抗-HBs 阳性的血清中,HBVDNA 检出率可达10%。     

青海藏羊,马鹿血清中HBsAg的检测

采用人乙型肝炎ＥＬＩＳＡ试剂盒，检测青海地区藏羊及马鹿血清中乙型肝炎表面抗原。结果：藏羊血清中ＨＢｓＡｇ阳性率为１０％，马鹿血清中未查出。     

对本校965名职工HB_sAg及肝功能检测结果分析

对本校965名职工进行了 HB_sAg 及肝功能的检测。结果查出 HB_sAg 阳性50例,阳性率5.18%。在 HB_sAg 阳性者中:肝功能异常者27例,占54.5％;以20岁～29岁阳性率最高;性别和职业上无明显差异。19例乙型肝炎病人的配偶 HB_sAg 均为阴性。915例 HB_sAg 阴性者中肝功能异常者28例,占3.1％,单项转氨酶高的54例,占5.9%。     

螺旋藻多糖在2215细胞培养中对乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原及HBV-DNA的抑制作用

研究螺旋藻多糖在乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌细胞系2215细胞培养中对细胞的毒性、对HBeAg和HBsAg分泌的影响及对细胞HBV-DNA的抑制效果.3批试验结果均表明:螺旋藻多糖加入细胞培养12 d对细胞的半数中毒浓度>4 mg/ml,最大无毒浓度为1.5±0.7 mg/ml;抑制细胞分泌HBeAg 50.4%;抑制HBsAg 42.7%;对HBeAg和HBsAg的半数有效剂量IC50分别为2.62±0.25 mg/ml和2.90±0.18 mg/ml,治疗指数分别为>1.53和>1.38,对HBV-DNA亦有一定抑制.说明螺旋藻多糖在2215细胞中无毒浓度可抑制HBeAg、HBsAg及HBV-DNA.     

献血前用全血金标法初筛HBsAg的结果与分析

目前 ,对无偿献血者献血前作全血金标法筛查 HBs Ag,是针对我国人群乙肝 HBs Ag阳性比率较高而设计的。献血前作HBs Ag的快速筛查 ,对保证血液质量 ,减少血液浪费有特定的意义。笔者对血站 2 0 0 1年 1～ 3月共 4 4 18名无偿献血者应用全血金标法快速筛查 HBs Ag的结果进行了分析 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　标本来源无偿献血者未梢全血标本 4 4 18份、(献血留样标本 390 4份、未梢全血金标快速筛查 HBs Ag阳性献血者采集其静脉血确认标本 5 14份 )。1.2　试剂及方法HBs Ag灵敏度标准参比品 ,由中国药品生物制品检定所提…     

硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响

以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达.破碎细胞收集细胞原液,离心15000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩.结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol·L-1时盐浓度低,HBsAg未结合到疏水介质上;硫酸铵0.24 mol·L-1时疏水性强, HBsAg不宜从介质上洗脱.表明0.20 mol·L-1硫酸铵更适合重组HBsAg纯化.     

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白的检测及临床意义

目的 观察乙型肝炎病毒表面大蛋白(LHBS)含量在乙型肝炎病毒标志物不同模式组的差别及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)和荧光定量PCR法对506例HBSAg阳性血清标本进行LHBS、HBV-DNA以及506例慢性乙型肝炎住院患者不同时期前的S1抗原和HBV-M进行检测,并对检测结果进行分析.结果 (1...     

ACS基因和HBsAg基因的克隆及瞬时表达分析

本研究通过SDS法从香蕉幼嫩叶片中提取基因组DNA,通过PCR的方法对ACS启动子2.5Kb的序列进行缺失改造,克隆到了长1 185bp的ACS启动子片段,与GenBank报道序列相比较同源性为93.2%.经PlantCARE软件分析发现序列中含有多种调控元件,经预测ACS启动子可能被光、热、GA、乙烯或伤所诱导.为验证其果实特异表达活性,通过插入到pBI 101.2中间表达载体上的GUS基因5＇端前,构建了含GUS基因的瞬时表达载体pBACS.用基因枪法将pBACS转化到香蕉果实中,结果表明：用pBACS包被的金粉轰击的果实经GUS组织化学染色后,都出现兰色斑点,对照没有出现兰色斑点.因此认为GUS基因在香蕉果实成功实现瞬时表达.同时,通过改进的酚-氯仿提取法从乙肝病毒感染者的血清中提取总DNA,然后根据报道的序列设计特异性引物,同时在上游引物中引入了Kozak序列,经PCR克隆到HBsAg基因序列,长度为681bp.NCBI BLAST分析的结果表明,获得的HBsAg基因序列及推导的氨基酸序列与GenBank中所报道的序列的同源率分别为97.2%和97.4%.将经过改造的HBsAg基因替代pBACS中的GUS基因,成功构建了含有ACS启动子和HBsAg基因的香蕉树果实表达载体,为下一步转化香蕉,获得在果实中表达HBsAg蛋白的转基因植株奠定了基础.     

绵羊血清,肝,肌肉中HBsAg的初步调查

应用ＥＬＩＳＡ技术对３０份羊血清，肌肉肝脏标本进行了ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ水平检测，结果血清阳性率２０％，肝脏阳性率１０％。表明羊体内含有ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ相似的类属抗原及相关抗体，提示对羊体内检出ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ应起重视，建议对羊开展乙肝的在ＨＢＣ与人ＨＢＶ的异同及关系，寻找ＨＢＶ动物模型．