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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
近年来,畜牧业蓬勃发展,动物疫病的预防和控制工作任务要求越来越高,动物疫苗管理与使用是动物疾病的预防和控制中最重要的一部分,直接影响着动物的发病率和我国畜牧业的健康发展。而目前,基层动物疫苗在管理和使用方面还有一些不足,本文从基层动物疫苗管理的现状、存在问题以及对策等几方面来进行探讨,以期更好的对动物疫苗进行规范管理。 相似文献
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4.
《畜牧与兽医》2017,(1):61-64
为建立1株猪源2009/H1N1流感病毒A/swine/Heilongjiang/44/2009(HLJ44)的反向遗传系统,利用双向表达质粒p HW2000,分别构建了该病毒株8个基因节段的重组质粒,将其共转染于293T和MDCK混合培养的细胞,拯救出重组病毒R-HLJ44。测序结果表明,R-HLJ44与亲本病毒HLJ44的核苷酸序列完全一致;二者在细胞上具有相似的增殖特性;抗原性未发生变化;分别以106TCID50的剂量鼻腔感染BALB/c小鼠,结果显示R-HLJ44与亲本HLJ44在小鼠脏器中的复制滴度也基本一致。以上结果表明拯救的重组病毒保持了与亲本病毒一致的生物学特性。该病毒反向遗传系统的建立,为进一步研究H1N1亚型流感病毒的致病分子机制及新型疫苗研制等奠定了基础。 相似文献
7.
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9.
生猪养殖过程中都需要采取免疫治疗措施,部分猪只在注射疫苗后会出现免疫应激反应,部分养殖户通过使用地塞米松或者肾上腺素进行注射,缓解猪只出现的免疫应激反应,但是养殖户还不知道应激反应后的猪只是否得到了疫苗的效果,下文将对猪疫苗应激反应和预防措施,以及出现免疫应激后续的处理方式进行介绍,同时对猪只病危的判断方法进行介绍,旨在为养殖场猪只的免疫治疗处理以及养殖管理提供帮助和指导。 相似文献
10.
疫苗是重要的防疫基础物资,基层动物防疫疫苗管理工作的质量高低关系到当地养殖业的健康发展。做好基层动物防疫疫苗的管理,必须合理配备疫苗冷链设施设备,加强冷链体系的建设,健全疫苗管理制度,强化疫苗的日常管理。 相似文献