鸡霍乱口服弱毒疫苗的研究

用经过选择的禽多杀巴氏杆菌自然弱毒菌株Ｒ１－２３菌株制成的鸡霍乱固体培养口服弱毒疫苗，其安全剂量接近于２００个免疫剂量。该口服苗两次饮水免疫的最适总剂量为每羽５０亿个活菌，最佳间隔时间为４８小时。免疫鸡第二次饮苗后第３天即可产生较好的免疫保护率（７／８）。免疫鸡对异型强毒株Ｐ１０５９（８∶Ａ）、Ｐ２７２３（９∶Ａ）和同型强毒株Ｃ４８－１（５∶Ａ）滴鼻攻击的近期保护率平均为５／１０、６／１０和９／１０。６个月免疫期的平均保护率为７６．７０％（４６／６０），一万多羽鸡田间试验结果表明，免疫后２个月的平均保护率为９３．１０％（２７／２９），６个月的平均保护率为７３．５０％（２５／３４），除对产蛋率有轻度影响（下降１．２７％）外，无其它不良反应。野外大面积使用结果表明，该口服苗不但性能稳定，免疫原性优良，而且安全可靠，适用于鸡口服免疫。     

猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)疫苗株的构建(初报)

采用磷酸钙转染系统 ,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA2 15株DNA与PP6 3LacZE2DNA共转染Vero细胞 ,获得SA2 15 (A) 1、SA2 15 (A) 2和SA2 15 (A) 3等 12个重组病毒株。以光生物素标记的HCVE2基因为探针进行初步鉴定后 ,挑选SA2 15 (A) 1株作BamHⅠ酶切和southern转印杂交鉴定 ,结果表明构建是成功的 ,将其命名为SA2 15(A)。直接荧光抗体检测、SDS -PAGE电泳和western免疫印迹检测结果表明HCVE2基因在重组病毒内获得表达 ,产生大小约 5 1kd的蛋白。对SA2 15 (A)株进行部分生物学特性研究 ,培养特性观察试验表明该毒株可适应Vero、BHK2 1和鸡胚成纤维细胞等多种细胞 ,但对不同细胞系表现有一定的差异。     

淮南麻黄鸡的提纯选择

淮南麻黄鸡原始群10只公鸡与75只母鸡交配所得子一代杂色羽率33.25%,白耳率7.27%,杂色喙率和杂色脚率分别只有3.64%和4.15%。表明原始群羽色基因纯合程度很低,耳色基因纯合程度较低,而喙、脚色基因纯合程度较高。经提纯选择后得予二、三代上述四个外貌性状分离比率分别降低到24.05%、0、2.75%、3.09%和17.25%、0、1.92%、2.24%。     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。     

禽霍乱油乳剂灭活苗（TJ株）的研制与应用

从天津地区某些发病鸡场分离的２０余株禽多杀性巴氏杆菌中筛选４株（ＴＪ株）作为制苗用菌种，制成油乳剂灭活苗，进行物理性状检验与安全性，免疫性试验，用实验室制备的禽霍乱油乳剂灭活苗（ＴＪ株）对大港，静海等发病鸡场进行免疫接种，完全控制了禽霍乱的流行。     

鸡霍乱流行病学研究

禽霍乱病原菌肌肉注射人工感染成年鸡后，禽霍乱病原菌首先局限于注射部位生长繁殖，其他部位不能检出菌，静脉注射禽霍乱病原菌入血后，血中含菌数很快就迅速下降，出现一个低谷期，然后才不断上升。各组织、器官在任一时刻的含菌数各不相同，肝、脾含菌量最高。在血中可测到禽霍乱病原菌数量增加时，所感染的鸡均出现临床症状，并在几小时后死亡。分析认为，在各好嗜性组织器官中禽霍乱菌的大量繁殖是导致病鸡死亡的关键因素。     

鸡传染性法氏囊病超强毒901株的分离和鉴定

从暴发鸡传染性法氏囊病死亡率６３．５１％的病死鸡中，分离出一株ＩＢＤ病毒９０１株，经检测，９０１株是一株ＩＢＤＶ超强毒株，可使３１日龄健康雏鸡７１．４％死亡，１０日龄ＳＰＦ鸡胚和３０日龄ＳＰＦ雏鸡１００％死亡。死亡鸡再现了自然暴发ＩＢＤ的典型病变。     

猪瘟病毒E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点整合载体的构建

 【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体，为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫苗奠定基础。【方法】通过用BLAST、DNAMAN等分子生物学分析软件对百脉根叶绿体基因组序列进行分析选定同源重组片段，采用PCR、分子克隆技术进行载体构建和鉴定。【结果】在百脉根叶绿体基因组中选择合适的外源基因整合位点，设计引物用PCR扩增叶绿体同源片段，将同源片段克隆后，构建百脉根特异的叶绿体转化载体；构建的百脉根叶绿体定点转化载体pAKE2以扩增的1.35 kb psbA 和1.5 kb trnK两段相邻叶绿体 DNA为定点整合外源基因的同源重组片段，包含以叶绿体基因特异强启动子Prrn和终止子TpsbA为调控序列的E2基因表达盒和aadA壮观霉素抗性基因表达盒。【结论】经PCR和酶切验证，所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。     

孵化期间乌骨鸡种蛋水钙变化研究

孵化期间，鸟骨鸡种蛋内蛋黄和蛋清的含水量变化呈互补性，即蛋黄含水多时．蛋清含水少，而胚胎的含水量是逐渐减少的。12日龄前，蛋壳、蛋清、蛋黄内钙含量变化相对较小，12日龄后，蛋壳内的钙比蛋清、蛋黄内的钙变化大，且成为胚胎发育过程中的主要钙源。试验还发现，孵化前蛋黄内的水、钙含量和出壳时剩余蛋黄内的水、钙含量相差不大，但18日龄前后，蛋黄内的钙大幅度上升，证实蛋黄有富集钙的功能。鸟骨鸡胚胎的生长在9日龄前是缓慢的，9日龄以后是快速的，且胚胎的重量与孵化时问的关系呈指数式回归。     

禽霍乱免疫母鸡血清抗体和蛋黄抗体消长规律及其相互关系的研究

通过对禽霍乱菌苗免疫产蛋母鸡的血清和蛋黄的抗体定时检测后发现，免疫母鸡的血清抗体和蛋黄抗体的升降趋势基本一致（ｒ＝０．９４），但后者较前者迟后３～６ｄ；血清抗体和蛋黄抗体的滴度分别在加强免疫后的１～３ｄ和３～６ｄ都有不同程度下降，加强免疫前的滴度越高，免疫后的滴度下降幅度越大；蛋黄抗体水平普遍比血清抗体水平低，两者间的差异极显著（Ｐ＜０．０１），这可能是与禽多杀性巴氏杆菌本身的主要抗原成分（ＴＩ抗原）在鸡体内主要产金ＩｇＭ有关。